蓖麻餅粕毒素高效降解菌的選育及脫毒條件的研究.pdf

1、蓖麻餅粕富含蛋白質(zhì)，是良好的植物蛋白飼料資源，但因其含有對(duì)動(dòng)物有毒的蓖麻堿和變應(yīng)原CB-1A，其利用價(jià)值和使用量受到限制。本文從提高農(nóng)副產(chǎn)品附加值，擴(kuò)大動(dòng)物飼料蛋白來源出發(fā)，探討微生物發(fā)酵法去除蓖麻餅粕中的毒素。篩選出高效降解蓖麻堿和變應(yīng)原的菌株，優(yōu)化了發(fā)酵培養(yǎng)基，探討了影響發(fā)酵脫毒的條件，考察了復(fù)配脫毒效果及其發(fā)酵條件對(duì)蓖麻餅粕生物發(fā)酵脫毒效果的影響，主要結(jié)果如下。
　　 采用單因素和正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，對(duì)微波法從蓖麻餅粕中提取蓖麻

2、堿條件進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明，以水為溶劑，最佳提取工藝條件為：料液比1:30，微波時(shí)間28 min，微波功率595 W。與氯仿提取法比較，微波法提取時(shí)間短但提取率較低。
　　 利用平板分離法，篩選出三株對(duì)蓖麻堿和變應(yīng)原具有較高脫毒率的菌種：BF、BC和SJM。BF和BC菌是革蘭氏陰性菌；SJM是產(chǎn)朊假絲酵母(Candida utilis)，細(xì)胞呈卵圓形，出芽繁殖。用麥芽汁液體培養(yǎng)，菌體沉淀于管底。平板培養(yǎng)菌落光滑，可形成假菌絲。BF

3、菌和SJM菌的適宜接種時(shí)間為20 h，BC菌為18 h。
　　 通過單因素及正交實(shí)驗(yàn)，優(yōu)化得到SJM酵母固態(tài)發(fā)酵脫毒最佳培養(yǎng)基組成為：蓖麻餅粕85％、麩皮15％、MgSO4·7H2O0.4％、CaCl20.2％、KH2PO40.4％。在優(yōu)化的培養(yǎng)基基礎(chǔ)上對(duì)發(fā)酵條件進(jìn)行了研究，確定了SJM酵母固態(tài)發(fā)酵脫毒的最佳培養(yǎng)條件：底物水分含量為60％，接入10％的SJM菌，30℃下發(fā)酵5 d，蓖麻堿和變應(yīng)原的降解率分別達(dá)到90.30％和93

4、.78％。發(fā)酵后蓖麻餅粕中的粗蛋白含量為44.53％，比發(fā)酵前餅粕中的粗蛋白含量提高了31.82％。
　　 利用BF菌和BC菌進(jìn)行單菌及復(fù)配菌種發(fā)酵，通過對(duì)底物中蓖麻堿和變應(yīng)原含量的測(cè)定，優(yōu)化其發(fā)酵工藝條件。優(yōu)化試驗(yàn)結(jié)果表明，菌種復(fù)配比例BF：BC為2:1，底物組成適宜比例為蓖麻餅粕80％、玉米粉8％、麩皮12％。蓖麻餅粕發(fā)酵脫毒的最佳條件為：發(fā)酵4 d，發(fā)酵溫度39℃，菌液接種量15％，底物水分含量70％，自然pH。蓖麻堿和變