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1、植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中所需要的實(shí)驗(yàn)條件植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中所需要的實(shí)驗(yàn)條件植物組織培養(yǎng)的大致過(guò)程是:在無(wú)菌條件下,將植物器官或組織(如芽、莖尖、根尖或花藥)的一部分切下來(lái),放在適當(dāng)?shù)娜斯づ囵B(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),這些器官或組織就會(huì)進(jìn)行細(xì)胞分裂,形成新的組織。不過(guò)這種組織沒(méi)有發(fā)生分化,只是一團(tuán)薄壁細(xì)胞,叫做愈傷組織。再適合的光照、溫度和一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與激素等條件下,愈傷組織便開始分化,產(chǎn)生出植物的各種器官和組織,進(jìn)而發(fā)育成一棵完整的植株。一、培
2、養(yǎng)條件一、培養(yǎng)條件1、溫度:大多數(shù)植物2332℃,一般252℃。低于15℃或高于35℃對(duì)植物的生長(zhǎng)不利,其中26~27℃最適合。2、光:包括光照強(qiáng)度、時(shí)間長(zhǎng)短、光照質(zhì)量等。組織培養(yǎng)通常在散射光線下進(jìn)行。光的影響可導(dǎo)致不同的結(jié)果。有些植物組織在暗處生長(zhǎng)較好,而另一些植物組織在光亮處生長(zhǎng)較好,但由愈傷組織分化成器官時(shí),則每日必須要有一定時(shí)間的光照才能形成芽和根。有些次生物質(zhì)的形成,光是決定三因素。3、滲透壓:滲透壓對(duì)植物組織的生長(zhǎng)和分化很有
3、關(guān)系。在培養(yǎng)基中添加食鹽、蔗糖、甘露醇和乙二醇等物質(zhì)可以調(diào)整滲透壓。通常1~2個(gè)大氣壓可促進(jìn)植物組織生長(zhǎng),2個(gè)大氣壓以上時(shí),出現(xiàn)生長(zhǎng)障礙,6個(gè)大氣壓時(shí)植物組織即無(wú)法生存。4、酸堿度:一般植物組織生長(zhǎng)的最適宜pH為5~65。在培養(yǎng)過(guò)程中pH可發(fā)生變化,加進(jìn)磷酸氫鹽或二氫鹽,可起穩(wěn)定作用。5、濕度條件培養(yǎng)容器中濕度100%培養(yǎng)室的濕度一般70%80%的相對(duì)濕度。6、通氣:懸浮培養(yǎng)中細(xì)胞的旺盛生長(zhǎng)必須有良好的通氣條件。小量懸浮培養(yǎng)時(shí)巨常轉(zhuǎn)動(dòng)或
4、振蕩,可起通氣和攪拌作用。大量培養(yǎng)中可采用專門的通氣和攪拌裝置。二、實(shí)驗(yàn)設(shè)備二、實(shí)驗(yàn)設(shè)備(一)可以分為幾個(gè)室1、洗滌室(區(qū))玻璃器皿和塑料器皿2、藥品室存放常用的化學(xué)試劑、無(wú)機(jī)鹽類、有機(jī)物、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑等3、制備室培養(yǎng)基的配制等4、滅菌室即消毒室,是培養(yǎng)基、玻璃器皿、塑料器皿和其他物品消毒滅菌的地方5、操作室也稱接種室,是開展組織培養(yǎng)研究包括接種、繼代、細(xì)胞融合等的場(chǎng)所。要求:干爽安靜,清潔明亮,墻壁光滑平整不易積污灰塵,地面平坦無(wú)縫便于
5、清洗和滅菌。6、培養(yǎng)室是將接種到培養(yǎng)瓶等器皿中的植物材料進(jìn)行培養(yǎng)的場(chǎng)所。主要設(shè)備:空調(diào)機(jī)、除濕機(jī)、換氣扇、培養(yǎng)架、燈光等(二)設(shè)備(5)移液管(吸管)用于吸取各種母液和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑,有條件的可用微量可調(diào)移液器。3、接種器械(1)鑷子有直鑷和槍鑷之分,接種和轉(zhuǎn)移材料常用槍鑷,槍鑷腰部彎曲,使用省力,槍鑷規(guī)格有16cm、20cm、23cm、26cm、30cm。(2)剪刀有直剪和彎剪之分,用于剪取植物材料、莖段,進(jìn)行繼代培養(yǎng)的轉(zhuǎn)接。(3)解
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