《二手煙對小白鼠肺部組織形態(tài)學(xué)生的影響》

1、<p>　　二手煙對小白鼠肺部組織形態(tài)學(xué)生的影響</p><p><b>　　1 研究背景</b></p><p>　　煙草危害已成為當今世界最嚴重的公共問題之一，也是人類健康所面臨的最大問題。</p><p>　　目前，全球共有 11 億吸煙者，每年導(dǎo)致近 500 萬例本可避免的死亡。我國目前約有 3.5 億</p>

2、<p>　　吸煙者，居世界各國之首。每年死于吸煙相關(guān)疾病的人數(shù)近 100 萬。大量的臨床觀察和動</p><p>　　物實驗證明吸煙能損害人體的各種組織器官，引起癌癥、高血壓、冠心病、腦中風、消化</p><p>　　性潰瘍、慢性支氣管炎、肺氣腫等多種疾病。而相對主動吸煙，被動吸煙產(chǎn)生的危害性更</p><p>　　大。目前有關(guān)被動吸煙對身體產(chǎn)生影響的研究

3、多數(shù)局限于臨床的流行病學(xué)調(diào)查研究，而被</p><p>　　動吸煙對身體各器官組織形態(tài)學(xué)上的影響研究的文獻報道很少。吸煙危害健康已成為一個嚴重的社會問題第四次“煙草1998年WHO或健康工作會議”指出，在發(fā)達國家每年死于與吸煙相關(guān)疾病的人數(shù)幾乎等于因酗酒、兇殺、自殺、吸毒、溺水、交通事故、工業(yè)事故和艾滋病死亡人數(shù)的總和。吸煙是一種不良的生活習(xí)慣，能誘發(fā)癌癥，引起多種心、腦血管疾病特別是肺癌、慢性支氣管炎和肺氣腫等

4、疾病的危險因素。調(diào)查結(jié)果顯示目前，我國每年約有100萬人死于與吸煙有關(guān)的疾病。在發(fā)達國家中，吸煙與肺癌死亡人數(shù)的85%有關(guān)，與支氣管炎及肺氣腫總死亡人數(shù)的75%有關(guān)，與心臟病總死亡人數(shù)的25%有據(jù)關(guān)。據(jù)統(tǒng)計，英國平均每4個吸煙者中有1人死于肺癌，中年死亡者中1/3死于肺癌和吸煙引起的心臟病。研究顯示全部癌癥患者發(fā)病的1/3與吸煙有關(guān)。在我國引起肺癌的原因，男性約有70%～80%歸因于吸煙，而女性約30%歸因于吸煙與被動吸煙。如果每天平均

5、吸煙20支，吸了20年的煙民患肺癌的危險性比不吸煙者高20倍。年齡小于20歲即開始吸煙者，死于肺癌的人數(shù)比不吸煙者高28倍。據(jù)美國科學(xué)家研究，吸煙者比不吸煙者平均要縮短壽命20年左右。 </p><p><b>　　2 研究內(nèi)容</b></p><p>　　將分組的小白鼠按照實驗方法進行實驗，觀察對比兩組小白鼠的肺細支氣管組織結(jié)構(gòu)、肺終末細支氣管組織結(jié)構(gòu)、肺細支氣管組

6、織結(jié)構(gòu)、肺終末細支氣管組織結(jié)構(gòu)、肺細支氣管組織結(jié)構(gòu)的變化。</p><p><b>　　3 研究方法</b></p><p>　　實驗動物模型的建立及處理</p><p>　　3.1 實驗動物分組 </p><p>　　60 只健康雄性小白鼠（4 week-old），隨機分為A、B、C 三組，每組 20 只。A 組為對照

7、組（正常飼養(yǎng)，不進行染毒）；B組為中劑量染毒組（1支煙∕次×5次∕天×4 周）；C 組為高劑量染毒組（2 支煙∕次×5 次∕天×4 周）。 </p><p>　　3.2 被動吸煙染毒 </p><p>　　采取靜式染毒方式，將香煙點燃后，迅速把煙頭部分放入自制通氣管道管口處，以</p><p>　　保證香煙煙霧第一時間進入染毒

8、缸，同時把一注射器（無針頭）插入煙蒂中，反復(fù)推拉， 使香煙充分燃盡。每日染毒 5次，每次 10 分鐘。每組染毒后充分通風，再進行下一組</p><p><b>　　動物染毒。</b></p><p>　　3.3 被動吸煙劑量 </p><p>　　煙霧劑量(g) =香煙重量－(香煙燃盡后灰燼+煙頭) = l.010－0.310 = 0.7，燃燒

9、一支香煙時，被動吸煙箱中煙霧濃度為=0.7÷0.036=19.44g?m3時，相應(yīng)兩支香煙燃燒時的煙霧濃度為 38.88g/m3</p><p><b>　　3.4 實驗方法 </b></p><p>　　每天早8：00 通風換氣，查看室內(nèi)溫度（室內(nèi)溫度保持在 18-22℃，相對濕度保持50-60％。），清理鼠籠（每隔 2 天用酒精擦洗一次），清除糞便、墊干

10、木屑，檢查小鼠健康狀況，稱量前一天每組小白鼠的攝食量及飲水量，并記錄，換上新的鼠糧及飲用水，剩料集中處理，每天的飼喂都是定時定量的，由小白鼠在實驗過程中自由攝取。8：30 – 下午4：30 之間為染毒時間，按照 B 組（1 支）、C 組（2支）的順序和劑量依次將一組小白鼠均置入染毒缸中，持續(xù)10 分鐘，充分通風后再進行下一組的被動染毒。每周稱量體重一次。持續(xù) 周后，每組各隨機抽取12 只，共 36只，先用鼠眼眶后靜脈叢采血法采血后，采用

11、快速脫頸椎法處死小白鼠，取雙側(cè)睪丸、腎、肺、脾及部分空腸，然后將這些器官用石蠟切片法制作組織切片，H-E 染色，利用顯微數(shù)字圖像分析處理系統(tǒng)觀察組織結(jié)構(gòu)的變化；血樣用沙利氏比色法測定血紅蛋白含量。</p><p>　　3.4.1 切片的制作及組織學(xué)觀察</p><p>　　玻片先于重鉻酸鉀濃硫酸溶液中浸泡 24 小時，再用洗潔凈清潔后，自來水充分沖洗干凈，置烤箱中干燥后，再浸于多聚-L-賴

12、氨酸溶液中 1 分鐘，室溫下晾干，制成防脫片的玻片。所有組織蠟塊沿器官長軸做連續(xù)切片，切片厚 5um，連續(xù)切片 6~8 張，置于60℃烤箱烤干備用。固定好的組織塊進行常規(guī)石蠟包埋、切片，行 H-E 染色，最后利用顯微數(shù)字圖像分析處理系統(tǒng)觀察各器官的組織結(jié)構(gòu)變化，進行常規(guī)組織病理學(xué)檢查。</p><p>　　3.4.2測定項目及生物學(xué)統(tǒng)計方法</p><p>　　本實驗需每天測定采食量，飲水

13、量，死亡率。每周測一次體重，處死后稱量肺、腎、睪丸、肝的重量，對數(shù)據(jù)進行 t 檢驗，與對照組比較是否有顯著性差異。</p><p><b>　　4 預(yù)期研究結(jié)果</b></p><p>　　煙草燃燒生成的煙霧是普遍存在的對個人和環(huán)境的污染物質(zhì),研究已證實,煙草燃燒生成的煙霧中含有 4000 多種物質(zhì),有害成分包括一氧化碳、生物堿、腈類、胺類、醇類、酚類、烯烴、烷烴、羰

14、基化合物、氮氧化物、多環(huán)芳烴、雜環(huán)族化合物、重金屬元素、有機農(nóng)藥等。這些有害成分中最主要的三種有害物質(zhì)是煙焦油、尼古丁和一氧化碳。吸煙對機體存在著廣泛的影響，表現(xiàn)為全身的毒性作用。本實驗制作了被動吸煙小白鼠模型，來探討被動吸煙對小白鼠部分器官組織形態(tài)學(xué)上的影響及其可能的影響機制。肺是呼吸系統(tǒng)的主要器官，其結(jié)構(gòu)的改變與其功能有密切聯(lián)系。排列于肺中支氣管上的纖毛會將外來異物從肺組織上排除并將肺中的微粒掃入痰或粘液中，最后將其排出來，香煙煙霧