豬源芽孢微生態(tài)制劑Z-27菌株的分離及應用.pdf

1、腹瀉是集約化養(yǎng)豬生產(chǎn)條件下較嚴重的疾病之一，尤其是在仔豬時期，腹瀉的發(fā)生率相當高，給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失。微生態(tài)制劑可調整機體的微生態(tài)平衡，抑制致病菌在腸道內的繁殖，在防治腹瀉的同時也避免了病原菌耐藥性的產(chǎn)生，有著抗生素無法比擬的優(yōu)點。芽孢桿菌制劑是微生態(tài)制劑的一種，其具有耐高溫、耐酸堿等優(yōu)點。芽孢桿菌微生態(tài)制劑可在動物腸道中產(chǎn)生蛋白酶、淀粉酶等多種消化酶，協(xié)助機體分解消化營養(yǎng)物質，提高飼料轉化率，降低養(yǎng)殖成本。
　　 本試

2、驗以健康仔豬糞便為樣品，利用膽酸鹽平板法和產(chǎn)酶平板法結合進行菌株初篩，利用病原菌平板法進行復篩，并通過人工胃液耐受性、人工腸液耐受性、高溫耐受性、產(chǎn)物性質分析及飼喂安全性試驗等，最終分離篩選得到耐0.3％膽酸鹽、產(chǎn)生多種消化酶和對病原菌拮抗活性最強的Z-27菌株。經(jīng)“中國農業(yè)微生物菌種保藏管理中心”從形態(tài)特征、生理生化特性、MIDI脂肪酸及16srDNA測序等方面對菌株進行菌種鑒定，Z-27菌株被鑒定為枯草芽孢桿菌(Bacillussu

3、btilis)。
　　 為了提高Z-27菌株發(fā)酵液的菌體濃度和芽孢濃度，對菌株的發(fā)酵條件進行了優(yōu)化。通過單因素試驗和正交試驗確定了Z-27菌株的最佳培養(yǎng)基為:玉米粉1.0％、豆餅粉1.5％、MnSO4·H2O0.07％、NaH2PO4·2H2O0.2％、Na2HPO4·2H2O0.4％、起始pH7;最佳搖瓶發(fā)酵條件為:最適接種量2.0％、最適溫度37℃、搖床轉速200r·min-1、搖瓶裝液50mL/250mL、發(fā)酵周期34h。

4、優(yōu)化后Z-27菌株發(fā)酵液的菌體濃度為1.83×109cfu·mL-1，芽孢形成率達到95％以上。
　　 在飼料中添加0.1％的Z-27菌劑進行仔豬飼喂試驗，結果表明，與對照組相比，試驗組仔豬糞便中大腸桿菌數(shù)量降低了61.0％，乳酸菌、雙歧桿菌和芽孢桿菌數(shù)量分別提高46.0％、47.4％和39.8％;試驗組仔豬糞便中蛋白酶、α-淀粉酶、纖維素酶和脂肪酶的平均活力分別提高了62.99％、34.56％、133.10％和66.57％;試

5、驗組糞便中的粗蛋白、淀粉、粗脂肪和粗纖維等有機成分含量比對照組分別下降了30.51％、52.13％、18.44％和26.73％，而無機成分的含量基本無變化。試驗組仔豬的平均日增重提高了9.38％，料重比降低了4.94％，腹瀉率下降幅度達83.22％。在肥育豬試驗中也得到相似結果。
　　 枯草芽孢桿菌Z-27制劑具有維護仔豬腸道微生態(tài)平衡、減少腹瀉、提高仔豬腸道消化酶活力、提高飼料轉化率、改善仔豬生長性能的作用，為研制芽孢型防腹瀉