華癸中慢生根瘤菌7653R效應蛋白NopP的共生功能及蛋白互作研究.pdf

1、根瘤菌可與豆科植物形成根瘤，這種共生關系的建立涉及根瘤菌與宿主植物之間復雜的基因表達調控、信號識別轉導、分子間相互作用等過程。其中根瘤菌的Ⅲ型分泌效應蛋白在上述過程中發(fā)揮重要作用。
　　在本室前期工作中，篩選獲得與華癸中慢生根瘤菌（Mesorhizobiumhuakuii)7653RⅢ型分泌效應蛋白NopP互作的紫云英宿主蛋白NIP43，通過雙分子熒光互補(BiFC)技術證實了二者在煙草細胞中的蛋白相互作用。針對7653R效應蛋白

2、NopP的共生功能及蛋白互作研究，本文取得了如下實驗結果。
　　其一，植物盆栽和共生表型檢測發(fā)現(xiàn)，相較于7653R，百脈根中慢生根瘤菌（Mesorhizobiumloti）MAFF303099也可在紫云英上結瘤，但是共生效應差。其表現(xiàn)為較弱的結瘤能力，葉片偏黃，植株矮小，固氮酶活偏低。然而，7653R不能與百脈根形成共生根瘤。將M.huakuii7653R的nopP基因導入MAFF303099后接種百脈根，其共生表型與接種野生型M

3、AFF303099的植株無顯著性差異。
　　其二，利用酵母雙雜交技術，分別檢測了廣宿主根瘤菌（Rhizobiumsp）NGR234、慢生型大豆根瘤菌（Bradyrhizobiumjaponicum）USDA6以及費氏中華根瘤菌（Sinorhizobiumfredii）USDA257中的NopP同源蛋白與NIP43的互作，發(fā)現(xiàn)B.japonicumUSDA6的NopP與NIP43可以發(fā)生蛋白互作。
　　其三，利用插入突變技術，