根瘤菌NGR234Ⅲ型分泌系統(tǒng)蛋白效應(yīng)因子NopL的純化及功能分析.pdf

1、豆科植物能與根瘤菌形成共生根瘤將氮?dú)廪D(zhuǎn)化為氨。由根瘤菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)泌出的Ⅲ型蛋白效應(yīng)因子在寄主特異性結(jié)瘤中起著非常重要的作用。NopL(nodulation outer protein L)是第一個被鑒定出來的由根瘤菌NGR234泌出的Ⅲ型蛋白效應(yīng)因子，目前對于它在寄主植物中的分子功能還不甚了解。本論文中，在含有質(zhì)粒pPROEX-InopL的大腸桿菌BL21(DE3)中表達(dá)nopL基因，純化得到帶有6×His標(biāo)簽的NopL重組蛋白并用于

2、免疫兔子得到抗NopL的血清。制備的血清能夠識別重組NopL蛋白(由大腸桿菌中表達(dá))以及根瘤菌NGR234分泌的天然NopL蛋白(由類黃酮誘導(dǎo)的NGR234培養(yǎng)物上清中提取得到)。為了研究NopL在植物細(xì)胞中的功能，用含有質(zhì)粒pTA7002，pTA7002nopL和pTA7002SIPK的農(nóng)桿菌進(jìn)行了煙草葉片注射轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明，在煙草(Nicotiana tabacum)葉片中共同表達(dá)nopL和：MAPK基因SIPK，能夠抑制SIP