甘蔗離體培養(yǎng)EMS誘變與抗旱誘變體鑒定的研究.pdf

1、本論文以桂糖35號(hào)(G35)、桂糖21號(hào)(G21)、新臺(tái)糖22號(hào)(ROC22)三個(gè)甘蔗品種嫩葉鞘為供試材料,建立了甘蔗愈傷組織和胚性細(xì)胞團(tuán)的誘導(dǎo)、增殖、分化以及再生植株的技術(shù)體系,研究了EMS處理胚性細(xì)胞團(tuán)后對(duì)其增殖、分化及再生植株的誘變效果,EMS浸泡甘蔗苗根部對(duì)其移栽成活率的影響,并對(duì)甘蔗誘變株系的抗旱性進(jìn)行了生理鑒定。研究表明:
　　1、甘蔗愈傷組織的誘導(dǎo)、增殖、分化和胚性細(xì)胞團(tuán)的增殖、分化及芽增殖和生根試驗(yàn)結(jié)果:
　

2、　(1)MS比B5、N6、Miller培養(yǎng)基更適合甘蔗嫩葉鞘愈傷組織的誘導(dǎo),春季(5月)取材時(shí),G35出愈率最高,達(dá)68.75％。
　　(2)較之其它季節(jié),在夏季(8月)取材時(shí)三個(gè)甘蔗品種出愈率最高,G35、G21、ROC22出愈率分別為82.5%、79.17%、75.42%。
　　(3)基本培養(yǎng)基及激素組合為MS+2,4-D2.5 mg/L+NAA0.2mg/L+KT1.0mg/L時(shí),三個(gè)品種的出愈率最高,G35、G21、

3、ROC22出愈率分別為93.33%、91.67%、87.08%。
　　(4)愈傷組織繼代代數(shù)為第5代時(shí),三個(gè)品種愈傷組織增殖倍數(shù)最高,G35、G21、ROC22分別為4.08、3.97、3.85;ROC22胚性細(xì)胞團(tuán)發(fā)生率在第3代最高,為46.25%;G35在第4代最高,為45.00%;G21在第5代最高,為40.00%。
　　(5)愈傷組織和胚性細(xì)胞團(tuán)繼代代數(shù)為第4代時(shí),最適宜三個(gè)甘蔗品種分化出芽。愈傷組織分化出芽率G35

4、(83.00%)>G21(79.58%)>ROC22(75.00%);胚性細(xì)胞團(tuán)分化出芽率G35(92.08%)>ROC22(90.00%)>G21(89.17%)。
　　(6)基本培養(yǎng)基及激素組合為MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.2mg/L附加TDZ0.05mg/L或PP3330.5mg/L時(shí),芽的生長(zhǎng)勢(shì)最好。其中附加 TDZ0.05mg/L時(shí),芽的增殖倍數(shù)效果最好:G35(5.00)>ROC22(4.88)>G21(

5、4.50)。
　　(7)基本培養(yǎng)基及激素組合為1/2MS+NAA0.2mg/L+IBA1.0mg/L+PP3330.6mg/L時(shí)對(duì)生根效果最好,三個(gè)甘蔗品種生根率達(dá)100%,平均根數(shù)G35(13.95)>ROC22(14.30)>G21(11.00),平均根長(zhǎng)G35(2.87cm)>G21(2.53cm)>ROC22(2.17cm)。
　　2、EMS處理對(duì)胚性細(xì)胞團(tuán)的誘變?cè)囼?yàn)結(jié)果:
　　(1)胚性細(xì)胞團(tuán)褐死率隨著EMS

6、浸泡時(shí)間的延長(zhǎng)和浸泡濃度的增加而增加,胚性細(xì)胞團(tuán)增殖倍數(shù)和分化出芽率則隨著EMS浸泡時(shí)間的延長(zhǎng)和浸泡濃度的增加而降低。
　　(2)經(jīng) EMS處理后得到一些芽增殖較好的變異株系,G21E1(0.2%EMS處理3h)、G35B2(0.05%EMS處理5h)、ROC22C2(0.10%EMS處理5h);培養(yǎng)基為 MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.2mg/L+TDZ0.05mg/L時(shí),各變異株系芽生長(zhǎng)勢(shì)最好,增殖倍數(shù)最高:G35B

7、2(4.86)>G21E1(4.66)>ROC22C2(3.90)。
　　(3)選取最適生根的培養(yǎng)基1/2MS+NAA2.0mg/L+IBA1.0mg/L+PP3330.6mg/L誘導(dǎo)各變異株系生根,生根率接近100%。綜合平均根長(zhǎng)、平均根數(shù)、苗生長(zhǎng)勢(shì)情況看,G21E1(0.2%EMS處理3h)、G35E2(0.2%EMS處理5h)、ROC22C2(0.1%EMS處理5h)、ROC22D2(0.15%EMS處理5h)生根質(zhì)量較好。

8、
　　3、EMS處理對(duì)甘蔗變異株系抗旱性的生理分析結(jié)果:
　　通過(guò)測(cè)定三個(gè)甘蔗品種變異株系的丙二醛含量、脯氨酸含量、過(guò)氧化氫酶含量、可溶性蛋白含量、可溶性糖含量、葉綠素含量,根據(jù)模糊數(shù)學(xué)中函數(shù)隸屬法進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。隸屬函數(shù)值即其加權(quán)值,加權(quán)值越大,表示耐旱性越好。無(wú)菌苗排在前7位的5項(xiàng)指標(biāo)的隸屬函數(shù)加權(quán)值大小順序?yàn)?ROC22Y2>ROC22X2>G35Y2>G21>G21X1>G21Z1>G35W2。移栽苗排在前7位的6項(xiàng)指