小鵝瘟病毒PCR檢測方法的建立和山東濟寧地區(qū)小鵝瘟流行病學調(diào)查.pdf

1、小鵝瘟是由鵝細小病毒引起的一種急性傳染病，主要侵害30日齡以內(nèi)的雛鵝和雛番鴨，以發(fā)病急，死亡率高，傳播快為特點。發(fā)病率和死亡率隨著日齡的增加而下降，主要侵害7日齡以內(nèi)的雛鵝和雛番鴨，根據(jù)發(fā)病情況分為3種類型，最急性型，急性型和亞急性型（殷震and劉景華，1997）。發(fā)病鵝主要以腸粘膜脫落，壞死，腸栓，脫水等為癥狀。1966年，匈牙利學者 Derszy用鵝胚也分離到病毒，他是國外第一個用鵝胚分離到病毒的人，并于1967年對本病進行了詳盡的

2、描述，但當時他卻把該病誤認為流感，直到1971年 Schettler確定這種病是由細小病毒引起。1978年建議把這種病稱為鵝細小病毒感染，1974年世界禽類學會為紀念 Derzsy的先期工作而將此病命名為 Derzsy氏?。―erzsy D，1975）。1995年 Zadori等首次報道了 GPV全基因序列,并將其與番鴨細小病毒基因序列進行了同源性比較（Zadori Z，1995）。
　　本病大流行具有一定周期性。在大流行以后當年

3、余下的鵝群都獲得了主動免疫，使次年的雛鵝具有天然被動免疫力，故本病不會在同一地區(qū)連續(xù)兩年發(fā)生大流行。由此可見，本病的發(fā)病率和死亡率一方面和日齡有關(guān)，另一方面取決于親代母鵝的特異性抗體水平。
　　免疫預防是控制小鵝瘟的重要措施。目前已建立了PCR、ELISA、間接免疫熒光技術(shù)、微量中和試驗等檢測小鵝瘟的方法，但是這幾種檢測方法均需特殊的儀器設(shè)備，且耗時長，不適于在基層推廣應用。因此，建立一種更加快速、靈敏的病毒檢測方法迫在眉睫。本研

4、究建立的聚合酶鏈式反應，具有操作簡單，快速，適合基層推廣的特點。
　　近年來小鵝瘟在我國的一些省、市、自治區(qū)均有流行,給養(yǎng)鵝業(yè)造成嚴重的危害,同時也給飼主帶來巨大的經(jīng)濟損失,因此受到國內(nèi)外學者和工作者的廣泛關(guān)注。
　　本研究通過工作之便，對所在地區(qū)鵝養(yǎng)殖現(xiàn)狀和小鵝瘟發(fā)病情況做了相應的調(diào)查，并對其流行情況做了匯總，以期對養(yǎng)鵝業(yè)小鵝瘟疾病的發(fā)生做出相關(guān)的預防措施。
　　本研究根據(jù)GENBANK上發(fā)表的小鵝瘟的vp3的序列信

5、息，設(shè)計了一對特異性引物，通過優(yōu)化各種條件，最終擴增出與預期片段大小一致的314bp的核酸片段，在通過相應的特異性實驗發(fā)現(xiàn)此引物僅能擴增出小鵝瘟的特異片段，能夠用來檢測小鵝瘟的發(fā)生。
　　本研究中對于分離到的10株病毒進行測序分析，結(jié)果顯示分離株之間，同源性最高達100％，最低也在95.2%以上，說明小鵝瘟病毒的擴增片段核苷酸變異很小，VP3是小鵝瘟的主要抗原，所以本研究對于免疫預防具有指導性的意義。
　　依據(jù)本研究中調(diào)查的