馬鈴薯Y病毒NIa蛋白酶基因介導(dǎo)的抗病性研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩51頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、為了制備PVY-C NIa的抗血清,首先構(gòu)建了6kD-NIa和VPg基因片段的原核表達載體.酶切和PCR 擴增得到PVY-C 6kD-NIa和VPg基因片段,分別克隆到表達載體pET-28a中,酶切鑒定、PCR擴增和序列測定結(jié)果證明目的基因正確插入到了載體pET-28a中,而且含有正確的閱讀框架.經(jīng)IPTG誘導(dǎo)后,分別表達了分子量約為27kDa和25kDa的蛋白.純化了VPg蛋白免疫兔子后,得到效價為1:3000的抗血清.Western

2、 blot分析表明VPg抗血清能夠與感染PVY-C植物中的NIa蛋白發(fā)生特異免疫反應(yīng),成功地獲得了特異性VPg多克隆抗體.對轉(zhuǎn)PVY-C 6kD-NIa基因煙草T<,2>和T<,3>代進行抗病性試驗,攻毒結(jié)果分三種類型:全部表現(xiàn)為抗病和恢復(fù);抗性喪失,全部表現(xiàn)為感病;抗病、恢復(fù)和感病三種表現(xiàn)型,發(fā)生了性狀分離.對T<,2>代和T<,3>代轉(zhuǎn)基因煙草PCR檢測和Southern blot結(jié)果表明PVY-C 6kD-NIa基因不僅整合到煙草

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論