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1、大蔥細(xì)胞質(zhì)雄性不育在雜種優(yōu)勢利用中具有重要價值,分子標(biāo)記輔助育種可提高育種效率,加快其不育系、保持系選育步伐.該研究以大蔥不育系209A、保持系209B、章丘大蔥、隆堯大蔥、萊蕪雞腿蔥、大宮黑、韓國大蔥等為試材,獲得了與胞質(zhì)位點、核恢復(fù)基因連鎖的標(biāo)記,探索了輔助育種的可行性,具體結(jié)果如下:1、胞質(zhì)育性位點標(biāo)記.利用220個隨機(jī)引物對不DNA(cpDNA)、線粒體DNA(mtDNA)進(jìn)行了RAPD(RandomAmplifiedPolym
2、orphicDNA)分析,獲得了5個與胞質(zhì)育性位點連鎖的標(biāo)記,分別是S13<,2800>、S38<,960>、S72<,300>、S73<,1100>、S200<,2400>.將特異片段S13<,2800>、S200<,2400>從凝膠中回收、純化,連接pGEM-T-easy載體,篩選克隆進(jìn)行了測序分析.利用回收純化的S13<,2800>片段經(jīng)放射性標(biāo)記作為探針,對不育系和保持系的mtDNA進(jìn)行了Southern雜交,兩系之間表現(xiàn)出了多
3、態(tài)性.2、恢復(fù)基因標(biāo)記.根據(jù)不育系209A、不同群體不育株與可育株24對雜交組合后代的分離情況,提出了胞質(zhì)-兩對主基因微效多基因互作的遺傳假設(shè).同時建立了大蔥AELP分析、銀染檢測的技術(shù)體系,揭示了兩基因池之間的差異,但其與恢復(fù)基因的連鎖關(guān)系尚需進(jìn)一步鑒定.在上述工作基礎(chǔ)上,分析了恢復(fù)基因輔助育種可行性,建立了恢復(fù)基因標(biāo)記輔助選育不育系、保持系的程序.3、兩種標(biāo)記的輔助育種比較、應(yīng)用.與胞質(zhì)育性位點標(biāo)記相比,核恢復(fù)基因標(biāo)記輔助育種可進(jìn)一
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