水稻苯達(dá)松敏感致死基因的SCAR標(biāo)記及其輔助育種.pdf

1、本研究致力尋找與bel基因緊密連鎖的分子標(biāo)記，并以此分子標(biāo)記輔助育種。具體結(jié)果如下： 1.用五種方法提取了水稻基因組DNA，并進(jìn)行了RAPD-PCR分析，結(jié)果表明這五種方法提出的DNA質(zhì)量都能獲得穩(wěn)定而理想的PCR擴(kuò)增效果。 2.通過預(yù)備試驗(yàn)，優(yōu)化了水稻RAPD反應(yīng)組份和反應(yīng)程序，建立了適于水稻RAPD反應(yīng)條件。采用隨機(jī)引物S20、S316對(duì)8077S×豐35的F2代進(jìn)行了RAPD分析，得到兩個(gè)標(biāo)記片段S20-420和S

2、316-600。 3.將RAPD擴(kuò)增產(chǎn)生的多態(tài)性片段進(jìn)行克隆、測(cè)序，根據(jù)測(cè)序結(jié)果合成了兩對(duì)特異性的SCAR引物，新合成的SCAR引物包含原有的RAPD引物序列。SC01引物在敏感單株中擴(kuò)增出一條423bp帶，抗感單株沒有擴(kuò)增產(chǎn)物；SC02引物在敏感單株中擴(kuò)增出一條606bp帶，抗感單株(純合)擴(kuò)增出一條約630bp帶，抗感單株(雜合)擴(kuò)增出這兩條帶。與RAPD標(biāo)記相比，SCAR標(biāo)記擴(kuò)增出的條帶清晰可辨，結(jié)果更可靠。 4.