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1、中國農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文小麥磷酸丙糖轉(zhuǎn)運(yùn)器(TPT)的定位、功能及基因表達(dá)的調(diào)節(jié)姓名:孫金月申請學(xué)位級別:博士專業(yè):生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師:陳珈20030601為抑制作剛。用5mmol/L葡萄蓿溶液處理小麥幼苗Id后,弘,基因的表達(dá)開始降,第4d時受到強(qiáng)烈的抑制。為了驗證己耱激酶0qXK)是否參與葡萄糖對小麥“r表達(dá)的調(diào)節(jié),用R丁一PCR方法克隆到一支度為581bp的HXKeDNA片段,部分構(gòu)建了dsRNAi真核表達(dá)載體pBI—H
2、XKRNAi。電激法轉(zhuǎn)化小麥原生質(zhì)體,檢測HXK活性為對照的962%,表明獲得了pBlHXKRNAi瞬時表達(dá)的原生質(zhì)體。采用3H,DIDS特異標(biāo)記TPT,比較野生和轉(zhuǎn)化原生質(zhì)體中葡萄糖、多種葡萄糖類似物以及HXK抑制劑(葡萄糖胺)對TPT表達(dá)量的影響。結(jié)果表明只有葡萄糖(10mmol/L)或者能被HXK磷酸化的葡萄萜類似揚(yáng)2deoxyglucose與活化的HXK共存時,TPT的表達(dá)才被抑制,初步分析認(rèn)為,葡萄糖可能是zPr對糖應(yīng)答反應(yīng)的
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