29035.金針菇免疫調(diào)節(jié)蛋白的重組表達(dá)及生物學(xué)特性的初探_第1頁(yè)
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1、東北師范大學(xué)碩士學(xué)位論文金針菇免疫調(diào)節(jié)蛋白的重組表達(dá)及生物學(xué)特性的初探姓名：徐貴雪申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：植物學(xué)指導(dǎo)教師：劉立俠20090601AbstractAfungalimmunomodulatoryprotein，F(xiàn)IPfveiSasmallproteinextractedfromFlammulinavelutipes，namedgoldenneedlemushroominChinawhichhasimmunomodulator

2、yactivitiesItobviouslytakesapartinphysiologyasantiallergydecreasingthegrowthofcancercells，intensifyinglotsofcytokinesfromTlymphocytesandSOonInthisstudytheFIPfvegeneWasclonedfromthegenomeoflocalgoldenneedlemushroom(Flammu

3、linavelutipes)WereconstructedtherecombinantexpressionvectorspPIC9KFIPfveandpET28()FIPfveandtransformedthetargetgeneintotheyeastPichiapastor捃GS1l5andEcoliBL21byelectroporationandthermaltransformationTheyeasttransformantsw

4、ereidentifiedbyculturemediaselectionTheyieldsoftherecombinantFIPfvewereabout152mg／Linyeastand30mg／Linbacteriarespectively111epurificationoftherecombinantproteinincludesionexchangechromatographDEAESepharoseFastFlowdialysi

5、sandlyophilizationnepurityofthereFIPfvewasprobably80％TheanTinoacidcompositionanalysisshowedthattherecombinantFIPhadthesanleaminoacidcomposeasthenatureone，nleCircularDichroismanalysisresultindicatedthatthesecondarystructu

6、reformWasdetectedandtherelativeproportionofthesestructureunitswassimilartothenaturalFIPwhichmightmeanthatthesimilarnatureandbioactive，reFIPfvewerecorrectlyfoldedandformedAndthephen01sulfuricacidmethodshowedthatthesugarco

7、ntentofthereFIPfveWaS42％implyingtheglycosylationintheyeastexpressionsystem功ebiologicalactivitiesofthepurifiedreFIPfveweretest功ereFIPfveexhibitedsimilarhemagglutinatingactivitytowardsredbloodcellstonatureproteinAndthereFI

8、PfvecallinduceGl／G0toSphaseofthecellcycleinperipheralbloodmononuclearcellswhichshowedthatreFIPfveseemedtobeanewmitogenInthispaperweclonedtheFIPfvegenewhichWasre—expressedinPichiapastorisandEcolfeffectivelyW色provedthatthe

9、recombinantFIPfvehadverysimilarbiologicalactivitiesasnatureFIPfve，whichwouldsupplysomebasisforfermentationbyalargescaleandtheapplicationsofreFIPfveintheantitumorantiallergic，healthorsupplementaryfoodsandmedicineinthefutu

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