28796.蛋白質(zhì)組學(xué)研究證實(shí)ptrf是膠質(zhì)母細(xì)胞瘤化療耐藥性的重要調(diào)節(jié)因子

1、南方醫(yī)科大學(xué)2011級碩士學(xué)位論文蛋白質(zhì)組學(xué)研究證實(shí)PTRF是膠質(zhì)母細(xì)胞瘤化療耐藥性的重要調(diào)節(jié)因子ProteomicidentificationofthepolymeraseIandtranscriptreleasefactorasanessentialmodulatorofglioblastomachemoresistance課題來源：國家自然科學(xué)基金(81041068，30971183，81372691)廣東省科技計(jì)劃(200980

2、30801230)，廣東省自然科學(xué)基金(81271314)學(xué)位申請人導(dǎo)師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學(xué)院汪鑫郭洪波教授外科學(xué)(神經(jīng)外科)專業(yè)型碩士第二臨床學(xué)院答辯委員會(huì)主席郭英教授答辯委員會(huì)成員陸永建教授李方成教授歐陽輝教授曹志愷教授論文評閱人曹志愷教授趙連旭教授2014年3月10日廣州摘要要的作用。2DDIGE對蛋白分離和量化相當(dāng)敏感。蛋白質(zhì)通過與不同的熒光染料標(biāo)記后混合，通過凝膠分離。蛋白質(zhì)組學(xué)方法為我們探索腫瘤的多藥耐藥、尋找

3、腫瘤生物標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)方面提供新的機(jī)遇。聚合酶I和轉(zhuǎn)錄釋放因子(PTRF)，最早稱為cavinl，在體外培養(yǎng)細(xì)胞中參與蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄復(fù)合物的解離。PTRF存在于細(xì)胞膜表面，與胞膜小泡轉(zhuǎn)運(yùn)，膽固醇平衡和脂類分解的調(diào)控有關(guān)。PTRF突變與人類先天性全身性脂肪代謝障礙有關(guān)?；蛳嗷プ饔醚芯勘砻?，PTRF除有上述功能外，還可能有其他功能。在前列腺癌和肺癌中，PTRF表達(dá)的缺失被認(rèn)為與腫瘤增殖有關(guān)。PTRF的胞質(zhì)微囊結(jié)構(gòu)蛋白和caveolinl在乳

4、腺癌的化療多藥耐藥中有著至關(guān)重要的作用。PTRF可誘發(fā)多種體外培養(yǎng)細(xì)胞及斑馬魚胚胎細(xì)胞中形成豐富的胞質(zhì)微囊。PTRF和caveolinl在細(xì)胞質(zhì)微囊中有著密切聯(lián)系。已有報(bào)道表明caveolin蛋白位于胞質(zhì)微囊，其對微囊本身有著至關(guān)重要的作用。Quann和他的同事發(fā)現(xiàn)，在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株u87中過表達(dá)caveolinl可抑制細(xì)胞生長和生存。與正常腦組織中的星形細(xì)胞相比，caveolinl在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞中的表達(dá)量明顯增多。在人類膠質(zhì)母

5、細(xì)胞瘤體內(nèi)外模型中，瘤細(xì)胞耐受TMZ后影響了caveolinl的表達(dá)。然而，PTRF在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中的相關(guān)研究卻很少。因此，在本實(shí)驗(yàn)中，我們研究PTRF在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株及臨床標(biāo)本中的表達(dá)和相關(guān)功能。并分析PTRF在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞耐藥性中的作用。我們的數(shù)據(jù)表明PTRF可成為膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者治療的新靶點(diǎn)，對膠質(zhì)瘤的治療可能具有重大意義。目的：本研究通過構(gòu)建膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系U251的化療耐藥細(xì)胞株U251AR，并通過熒光標(biāo)記的雙向電泳

6、技術(shù)及蛋白質(zhì)譜技術(shù)測定U251及U251AR差異表達(dá)的蛋白；通過westernblot及QRTPCR驗(yàn)證差異表達(dá)蛋白PTI心在各細(xì)胞株中的表達(dá)。并構(gòu)建干擾質(zhì)粒敲除PTRF在U251及U251AR中的表達(dá)，MTT及細(xì)胞耐藥性進(jìn)一步證實(shí)PTRF在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤化療耐藥性中的作用。同時(shí)，我們研究PTRF的協(xié)同蛋白caveolinl在U251AR細(xì)胞系中表達(dá)。最后，我們免疫組化及QRTPCR技術(shù)在原發(fā)性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤及常規(guī)化療后復(fù)發(fā)的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患