版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)
文檔簡介
1、DissertationSubmittedtoZhejiangUniversityofTechnology⑧fortheDegreeofMaster一‘1‘p一’‘‘●一‘‘InterventionOtSilibinininInsulinResistanceinSkeletalMuscleCellsInducedbyPalmitateCandidate:YingDingAdvisor:HanbingLiCollegeofPharmace
2、uticalScience,ZhejiangUniversityofTechnologyMay,2014浙江工業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文水飛薊賓干預(yù)棕櫚酸誘導(dǎo)骨骼肌細胞胰島素抵抗作用的研究摘要目的:探究體外培養(yǎng)C2C12骨骼肌成肌細胞的增殖分化過程及特征,優(yōu)化培養(yǎng)分化條件,建立基于熒光標記的葡萄糖轉(zhuǎn)運模型,利用棕櫚酸孵育誘導(dǎo)骨骼肌細胞胰島素抵抗,探討水飛薊賓對胰島素抵抗的干預(yù)作用及相關(guān)機制。方法:(1)用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)C2
3、C12細胞,通過形態(tài)學(xué)考察來檢測其增殖狀況;待細胞成長到匯合至80~90%,用含1%胎牛血清(v/v)和含2%馬血清(v/v)的培養(yǎng)基分別誘導(dǎo)細胞分化,倒置相差顯微鏡觀察細胞形態(tài)變化。Hoechst染色,熒光顯微鏡觀察:(2)利用熒光探針2NBDG表征骨骼肌細胞攝取葡萄糖,應(yīng)用酶標儀和熒光顯微鏡考察細胞對2NBDG的轉(zhuǎn)運,評估其作為光學(xué)探針檢測骨骼肌細胞攝取葡萄糖的能力確定其最佳作用濃度和最佳作用時間;(3)棕櫚酸孵育骨骼肌細胞16h,
4、通過考察骨骼肌細胞在胰島素刺激下對葡萄糖的轉(zhuǎn)運,評價飽和脂肪酸棕櫚酸對骨骼肌細胞胰島素敏感性的影響,建立胰島素抵抗模型:(4)考察骨骼肌細胞葡萄糖攝取和葡萄糖轉(zhuǎn)運體4(GLUT4)的表達和轉(zhuǎn)位的變化:利用Westernblot檢測胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路關(guān)鍵環(huán)節(jié)AKT、pAKT(Ser473)、pIRS—l(Ser307)和相關(guān)絲氨酸蘇氨酸蛋白激酶pJNK、pigaq3、pPKC一0的表達,同時分析細胞活力、乳酸脫氫酶(LDH)和活性氧(RO
5、S)的變化,探討水飛薊賓改善飽和脂肪酸誘導(dǎo)的骨骼肌細胞胰島素抵抗的作用機制。結(jié)果:(1)正常C2C12細胞呈梭形,誘導(dǎo)分化過程中多個細胞發(fā)生融合成一個細胞,并且細胞呈現(xiàn)極性,規(guī)律性的沿一個方向逐漸平行排列,形成肌管,Hoechst染色可見多個細胞核。2%的馬血清誘導(dǎo)細胞分化形成的肌管較為粗壯,數(shù)量較少,l%的胎牛血清誘導(dǎo)細胞分化形成的肌管較為細長,但數(shù)量較多。(2)肌管攝取2NBDG最佳濃度為100“molL~,最佳時間為30min。(
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- STARS在棕櫚酸誘導(dǎo)的肌細胞胰島素抵抗中的作用.pdf
- TLR4在脂肪酸誘導(dǎo)人骨骼肌細胞胰島素抵抗中作用的研究.pdf
- Mfn2對棕櫚酸誘導(dǎo)的大鼠骨骼肌細胞氧化應(yīng)激與胰島素抵抗的影響.pdf
- 津力達改善棕櫚酸誘導(dǎo)的肌細胞胰島素抵抗的機制.pdf
- 棕櫚酸誘導(dǎo)心肌細胞胰島素抵抗體外模型的建立.pdf
- 蛋白激酶C在胰島素抵抗骨骼肌細胞中的作用.pdf
- 葡萄糖胺誘導(dǎo)的骨骼肌細胞胰島素抵抗模型PTEN的表達.pdf
- NF-κB過度激活損害C2C12骨骼肌細胞胰島素敏感性且介導(dǎo)棕櫚酸所致胰島素抵抗.pdf
- 缺氧脂肪細胞條件培養(yǎng)基造成骨骼肌細胞胰島素抵抗.pdf
- 原代培養(yǎng)骨骼肌細胞胰島素抵抗模型的建立及其機制研究.pdf
- 鳶尾苷元對大鼠原代骨骼肌細胞胰島素抵抗的影響.pdf
- PTEN對胰島素抵抗的骨骼肌細胞調(diào)亡的影響及吡格列酮的干預(yù)研究.pdf
- 胰島素抵抗大鼠骨骼肌細胞蛋白激酶B的表達及羅格列酮的干預(yù)研究.pdf
- 水飛薊賓對小鼠胰島β細胞糖脂毒性的保護作用.pdf
- 二氫楊梅素通過誘導(dǎo)細胞自噬改善骨骼肌胰島素抵抗的作用及其機制研究.pdf
- 水飛薊賓對高脂誘導(dǎo)大鼠非酒精性脂肪肝胰島素抵抗和脂聯(lián)素的影響.pdf
- 胰島素對骨骼肌細胞SREBP-1c的調(diào)節(jié)作用.pdf
- 大鼠骨骼肌細胞GLUT4、Akt2在間歇低氧導(dǎo)致胰島素抵抗中的作用.pdf
- GDF11在骨骼肌胰島素抵抗中的作用研究.pdf
- 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)高脂及棕櫚酸致骨骼肌胰島素抵抗及非諾貝特的干預(yù)機制初探.pdf
評論
0/150
提交評論