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1、重慶大學(xué)碩士學(xué)位論文眼斑芫菁全長cDNA文庫的構(gòu)建及EST序列分析姓名：靳貴曉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物學(xué)指導(dǎo)教師：殷幼平201004重慶大學(xué)碩士學(xué)位論文英文摘要IIABSTRACTMylabrisCichiiLinnaeus(Coleoptera:Meloidae)isanimptantChinesetraditionalmedicinelistedintheeditedin2005(abbreviatedastheChineseP
2、harmacopoeiaCh.P.2005)whichpotentcontentcantharidinishighlypoisonoustomostofanimals.FitsextensiveusinginmedicinetherequirementhasupincreasedthenaturalresourcesofMylabrisCichiihavebeendramaticallydecreasedinChina.Thereare
3、alotofresearchesachievedabouttherearingofMeloidaeinsectscantharidinsynthesisapplication.HoweverithaslittleresearchaboutMeloidaephysiologybiochemistrymolecularbiologyevencompletelyblankinsomefield.Itstranomicdataofcrestti
4、meofcantharidinbiosynthesiswouldprovideinvaluableinfmationfmolecularentomologypaveawayfthereserchofdiapauseofMeloidaeinsectscantharidinbiosynthesissoonitwouldmakefoundationfachievingtheartificialbreedingofMeloidaeinsects
5、betterutilizationtheresourcesofcantharidinevencantharidinartificialsynthesis.WeedseparatedrearingMylabrisCichiiLinnaeusadultswhichtwentyfivedaysaftereclosionasmaterialstoconstructthecDNAlibrary.mRNAwasextractedfromInsect
6、sthenwesynthesisthesscDNAbyRTPCR.ThedscDNAweresynthesizedbytheLDPCRthenweuseddscDNAmethan200bptoligatewiththecarriertheproductsweretransfmedintoXL1BlueElectricEscherichiacolicells.30independentcolonieswereromlypickedfrom
7、malefemalecDNAlibraryrespectivelyaftertreatedbysoftwarewegot34ESTs.Aftercomparedwiththedatabasewerefoundthatsomegeneshaveimptantphysiologicalfunctions.Themainresultsasfollows:①Wesuccessfullyconstructedthemalefemaleadultc
8、DNAlibraryofMeloidaethequalityoflibrariesmeettherequirements.Theycanbeusedffurtherstudy.②WegotsomeESTsfromthecDNAlibrariesafterapreliminarycomparisonwefoundthatESTsequencesfromtwocDNAlibrarieshadnosignificantdifferencesi
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