轉(zhuǎn)Hu-IFN-α草魚(yú)性腺發(fā)育的研究以及Hu-IFN-α在轉(zhuǎn)基因草魚(yú)體內(nèi)的遺傳.pdf

1、草魚(yú)是中國(guó)主要的養(yǎng)殖品種之一,但其病害多,每年給中國(guó)淡水養(yǎng)殖業(yè)造成數(shù)億元經(jīng)濟(jì)損失,尤其是病毒性的草魚(yú)出血病;因此草魚(yú)抗病育種一直是中國(guó)水產(chǎn)工作者研究的重點(diǎn).在草魚(yú)抗病育種的初期,育種的方法多采用常規(guī)雜交和選擇壓力育種;到20世紀(jì)50年代末60年代初,隨著細(xì)胞工程技術(shù)的發(fā)展,細(xì)胞工程在草魚(yú)抗病育種上也得到了充分的運(yùn)用.然而,這些育種技術(shù)均存在育種周期長(zhǎng)、優(yōu)良性狀遺傳不穩(wěn)定等不足之處.隨著DNA重組技術(shù)的發(fā)展,基因工程技術(shù)為這一目標(biāo)的實(shí)現(xiàn)奠

2、定了基礎(chǔ),這也為定向培育新的品種開(kāi)辟了一條新途徑.1998年本課題組通過(guò)分子重組,將人α-干擾素(Human α-interfer0n,Hu-IFN-α)基因編碼序列克隆到鯉魚(yú)β-肌動(dòng)蛋白基因啟動(dòng)子下游,構(gòu)建成能在魚(yú)體內(nèi)組成型表達(dá)Hu-IFN-α的基因重組分子,采用顯微注射法將Hu-IFN-α重組基因注射入草魚(yú)1-2細(xì)胞期的受精卵,培育出轉(zhuǎn)人α-干擾素基因草魚(yú),實(shí)驗(yàn)證明轉(zhuǎn)人α-干擾素基因草魚(yú)對(duì)草魚(yú)出血病病毒的抗性比普通草魚(yú)提高了66％.

3、Hu-IFN-α基因作為魚(yú)類(lèi)一種新的轉(zhuǎn)植基因,那么它對(duì)魚(yú)類(lèi)性腺發(fā)育及孵化是否存在影響,同時(shí)它在子一代中的遺傳和表達(dá)情況如何?都值得研究.該文就這幾個(gè)方面進(jìn)行了研究和探索.1.將處于不同發(fā)育時(shí)期的轉(zhuǎn)基因草魚(yú)性腺和相對(duì)應(yīng)的普通草魚(yú)性腺,作組織切片檢查,以研究人α-干擾素基因?qū)Σ蒴~(yú)發(fā)育的影響;結(jié)果表明,人α-干擾素基因作為魚(yú)類(lèi)一種新的轉(zhuǎn)植基因,它對(duì)魚(yú)類(lèi)性腺發(fā)育及孵化無(wú)顯著影響.2.隨機(jī)抽取轉(zhuǎn)入α-干擾素基因草魚(yú)F1代332尾,用ELISA檢測(cè)