β-1，3-葡聚糖酶的純化、特性及其抗菌活性.pdf

1、該研究對一株高產β-1,3-葡聚糖酶的鏈霉菌株,其酶的分離純化、酶特性以及抗菌活性進行了系統(tǒng)的研究,旨在為土傳病害的生物防治奠定理論基礎.其結果如下:1.自泰安郊區(qū)大白菜植株根際土壤,利用誘導法-茯苓粉瓊脂培養(yǎng)基的透明圈試驗,分離篩選到37株產β-1,3-葡聚糖酶的菌株,細菌18株,真菌7株,放線菌12株.其中,4株鏈霉菌菌株R8,R15,R31和AS產生的透明圈較大,澄清度較高且持續(xù)時間較長.而R15是一株高產β-1,3-葡聚糖酶的鏈

2、霉菌株,初步鑒定為金色鏈霉菌(Streptomyces aureo chromogenes).2.在ABP培養(yǎng)液中誘導培養(yǎng),離心即獲得粗酶液,測定其分解β-1,3-葡聚糖的酶活力.第11d酶活性最高,為最佳產酶時間.粗酶液經10％-75％的硫酸銨分級沉淀、羥基磷灰石(HA)柱層析、纖維素DEAE-52柱層析等步驟獲得凝膠電泳均一的β-1,3-葡聚糖酶,純化倍數(shù)為13.98,回收率達4.031％.經SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳測的該酶的分子

3、量為41.3KDa.3.酶特性研究表明,該酶作用的最適溫度為55℃,45-60℃范圍內酶活力較高,相對酶活在70％以上.最適pH為5.0,pH4.5-6.0的范圍內酶活較高,相對酶活力高于.該酶的熱穩(wěn)定性為55℃,溫度至65℃時,酶基本失活,酶活損失率達90.3％.在pH低于7.5時,該酶相對穩(wěn)定,酶活力為85％以上.當pH達到8時,殘余酶活力仍達55.97％.金屬離子Fe<'3+>,K<'+>,Cu<'2+>,Hg<'2+>對酶有抑制

4、作用,而Ca<'2+>,Fe<'2+>,Ba<'2+>,Mn<'2+>,Al<'3+>及Zn<'2+>對酶有激活作用.4.抑菌圈試驗表明,該酶對小麥紋枯病菌(Rhizoctonia cerealis),小麥根腐病菌(Bipolaris sorokiniana),菜豆枯萎病菌(Fusarium oxysporum)以及腐霉菌(Phthium spp.)都有一定的抑制作用.其中對小麥紋枯病菌抑制作用最強,抑菌圈寬度達15mm.盆栽防病試驗結