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1、南開大學(xué)碩士學(xué)位論文sOGT蛋白OGlcNAc修飾位點(diǎn)定位及其對(duì)sOGT功能影響姓名:孫紅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):微生物學(xué)指導(dǎo)教師:張連文201205AbstractAbstractTheadditionofO—linked13Nacetylglucosamine(OGlcNAc)toSer/Thrresiduesofnuclearandcytosolicproteinsisdynamic,inducible,andposttransl
2、ationalmodificationwhichisrelatedtomechanismsofmanydiseasessuchasdiabetes,cancerneurO—degenerationdiseasesOGlcNAcylationisregulatedbyNacetylglucosaminetransferase(OGT)andNacetylglucosamindase(OGA)whichareinchargeoftheadd
3、itionandremovalofO—GlcNAcrespectivelyThreetypesofOGTexistinvivo:ncOGT(nuclearcytoplasmicOGT),mOGT(mitochondrialOGT)andsOGT(shortOGT)Infact,OGTnotonlyglycosylatesitsproteinandpolypeptidesubstrates,butasloCanbeselfOGlcNAcy
4、latedtowhichlittleattentionhasbeenpaidItisstillunclearhowO—GlcNAcylationregulatesOGTanditsspecificroleinregulatingcellularprocessesStudyinvitrevealsthatamongthethreetypesofOGT,selfOGlcNAcylationofsOGTismostsignificant,fo
5、rwhichsOGTischosenasourresearchobjectInthisstudy,sOGTwithhighpurityandactivityisobtainedusingEcoliandNi2affinitycolumnThen6OGlcNAcylationsitesonsOGT(T12,S18,T38,$52,T449,T662)aremappedbyLCMSandWesternBlotThenweinvestigat
6、edfunctionaleffectofO—GlcNAcylationonsOGTrespectivelyusingpolypeptide(CKII)andprotein(Nup62)assubstratesResultsshowsthat0GlcNAcylationhasnosignificanteffectonthefunctionofsOGTtowardsCKIIbutsOGTFM(T12A&S18A&T38A&S52A&T449
7、A&T662A)failstotransferGlcNActoNup62whichmeansO—GlcNAcylationhascertaineffectsonsOGT’SfunctionThisstudyhelpsunderstandingOGT’SregulatorymechanismofcellularprocessesandprovidesnewbasisforfutureworkrelatedKeyWords:Nacetylg
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