17059.植物甾醇氧化物的制備及其細(xì)胞毒性的初探

1、獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不包含為獲得安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名：簽字日期：冽年多月莎日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本學(xué)位論文作者完全了解安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的

2、規(guī)定，有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子文件，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，收錄到《中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)》，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文，向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。(保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書(shū))。學(xué)位論文作者簽名：簽字口期：勱／)年易月孑|1學(xué)位論文作者畢業(yè)后去向：工作單位：通信地址：擼導(dǎo)教師簽名：孜堤簽字日期：幻膽年／月

3、8卜』電話：郵編：摘要植物甾醇因具有降fL王I：J嗵吲醇吸收的功效，近年來(lái)備受關(guān)注，許多閉家相繼開(kāi)發(fā)1『，種類(lèi)繁多的富含植物甾；醇的功能性食品。然而，由’Ⅱ其化。學(xué)結(jié)構(gòu)上含訂雙鍵，植物甾醇和H日固醇郜容易受到外界各種因索(如空7e、光、熱、嗨等)的影響，在‘fi產(chǎn)和1儲(chǔ)存過(guò)程可能發(fā)牛氧化，產(chǎn)牛人量氧化物。已有研究表明，膽固醇氧化物與‘一系列柏‘害的與磷脂代謝和細(xì)胞功能相火的人類(lèi)疾病有天，并矗示出細(xì)胞毒性、致突變和致癌等性質(zhì)。植物甾醇，J

4、以經(jīng)歷與_Jl固醇問(wèn)樣的氧化過(guò)程，7卜成植物甾醇氧化物，【qj1E植物甾醇氧化物很有一叮能對(duì)人體健康產(chǎn)牛不利影響。11前對(duì)f這類(lèi)物質(zhì)的?，q活性研究卻很少，豐要原兇是由于|二j前尚兀商業(yè)化的植物甾醇氧化物標(biāo)準(zhǔn)品，因此對(duì)于植物甾醇氧化物的牛理效應(yīng)和安全性尚無(wú)定論。木研究以膽【州醇、豆甾醇和混合植物甾醇為實(shí)驗(yàn)材料，采用薄層色譜法和高效液相色潛法分析制備了植物甾醇單體和熱氧化物，采刖化學(xué)合成法合成1廠兩類(lèi)ii要的甾醇氧化物，對(duì)氧化物及中間產(chǎn)物的

5、色譜行為和化學(xué)結(jié)構(gòu)性質(zhì)進(jìn)行了研究，并對(duì)氧化物的細(xì)胞毒性效應(yīng)進(jìn)行了初探。高效液相色譜法是分析植物甾醇及其氧化物的1i要方法之。。在木實(shí)驗(yàn)巾，通過(guò)對(duì)液相色譜柱和流動(dòng)相的試驗(yàn)，獲得J7最佳分析條件：色譜柱為AgilentEclipseXDB—C8柱，流動(dòng)相為乙腈／異丙醇=9：l(v／v)39混合溶劑，流速為10mL／min，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)208nm。該分析條件／fi儀能夠有效地分離植物甾醇混合物，而lL還能成功分離后續(xù)合成的氧化產(chǎn)物，H對(duì)符類(lèi)被

6、分析物的保留時(shí)間較短，可往化學(xué)合成過(guò)程中監(jiān)洲反應(yīng)進(jìn)度。為了獲得足鏈牛理活性研究所需的植物甾醇氧化物，術(shù)研究白‘先分別從高純度的膽Ib】醇和i、，甾醇單體出t發(fā)，化學(xué)合成了結(jié)構(gòu)為7keto一幣N71]一OH膽固醇氧化物，以及7keto一和76一OH—k』甾醇氧化物：然后，以一種混合植物甾醇(Generol95R)為起始物，合成J77keto一和7B—OH一混合植物甾醇氧化物。根據(jù)薄層色譜(TLC)和高效液相色譜(HPLC)的分析結(jié)果I叮以

7、發(fā)現(xiàn)，植物甾孵氧化物及其中問(wèn)產(chǎn)物的保留值與月L!同醇和。了甾孵同結(jié)構(gòu)的化合物相同一且洗脫順序』飛有棚似的規(guī)律，這表明起始混合植物甾醇巾的荇單體以相同的速二莽參!』了化學(xué)反應(yīng)。基于6訂述的分析：堰JHPLC對(duì)7一keto一$117B—OH一植物甾醇氧化物的分析結(jié)果，我們采用m恥號(hào)的、仁制備高效液市I色譜(semi—preparativeHPLC)對(duì)植物甾孵氧化物進(jìn)仃J7分離制備，經(jīng)過(guò)循環(huán)進(jìn)樣并收餾分，獲得了，U種r島純度的植物甾醇氧化物單