15726.cabl調(diào)節(jié)aif亞細(xì)胞定位的機(jī)理研究

1、中圖分類號Q三壘!UDC570碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼!Q三三密級公開c—Abl調(diào)節(jié)AIF亞細(xì)胞定位的機(jī)理研究Thesubcellulardistributionofapoptosis—inducingfactorisregulatedbyc—Ablkinase作者姓名：學(xué)科專業(yè)：研究方向：學(xué)院(系、所)：指導(dǎo)教師：副指導(dǎo)教師：凌麗君生物學(xué)遺傳學(xué)生命科學(xué)學(xué)院曹誠研究員劉萱副研究員論文答辯日期絲睦上!Z答辯委員會主席中南大學(xué)二O一三年五月c—

2、AbI調(diào)節(jié)AIF亞細(xì)胞定位的機(jī)理研究摘要：凋亡誘導(dǎo)因子AIF(apoptosisinducingfactor)由Kroemer等人在1996年發(fā)現(xiàn)并命名。當(dāng)用caspase廣譜抑制劑zvadfmk處理細(xì)胞時(shí)，AIF能參與caspase非依賴細(xì)胞凋亡途徑，促進(jìn)細(xì)胞凋亡。除了能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡外，AIF還對線粒體形態(tài)完整、能量代謝穩(wěn)態(tài)及氧化應(yīng)激具有重要調(diào)控作用。非受體酪氨酸激酶cAbl由人9號染色體的c一動(dòng)Z基因編碼，屬于Src非受體酪氨酸激酶

3、家族重要成員。在細(xì)胞中，c—Abl蛋白能調(diào)控多種生命活動(dòng)，如細(xì)胞增殖、細(xì)胞粘附、DNA損傷修復(fù)、氧化應(yīng)激及細(xì)胞凋亡等。在氧化應(yīng)激狀態(tài)下，c—Abl可聚集到線粒體上并介導(dǎo)線粒體功能損傷及細(xì)胞凋亡。然而，目前cAbl通過線粒體調(diào)控胞內(nèi)氧化應(yīng)激的分子機(jī)制尚未明確。實(shí)驗(yàn)室前期研究表明，非受體酪氨酸激酶cAbl能夠與凋亡誘導(dǎo)因子AIF相互作用?？筽—Tyr抗體的WestemBlot實(shí)驗(yàn)表明，cAbl和A唱能使AIF發(fā)生酪氨酸磷酸化。本研究通過一系

4、列細(xì)胞免疫熒光染色、免疫沉淀、免疫印跡實(shí)驗(yàn)證明，cAbl特異性抑制劑STl571可誘導(dǎo)AIF亞細(xì)胞分布改變，干擾AIF前體進(jìn)入線粒體，使細(xì)胞內(nèi)線粒體膜電位下降，最終導(dǎo)致ROs(reactiveoxidativespecies)水平升高，線粒體發(fā)生片段化及自噬。該現(xiàn)象能被具有線粒體錨定功能的COXAIF緩解。進(jìn)一步研究表明，cAbl能使AIF前體發(fā)生酪氨酸磷酸化，且磷酸化位點(diǎn)很可能位于AIF1120aa的線粒體定位信號區(qū)域。同時(shí)，我們還發(fā)