11420.基于適體技術化學發(fā)光檢測生物小分子腺苷

1、分類號：密級：UDC：學號：405805611034南昌大學碩士研究生學位論文基于基于適體技術適體技術化學發(fā)光檢測化學發(fā)光檢測生物小分子生物小分子腺苷腺苷BasedonAptamerChemiluminescenceDetectionofSmallBiomoleculesLikeAdenosine魯盧培養(yǎng)單位（院、系）：環(huán)境與化學工程學院指導教師姓名、職稱：肖鑒謀教授申請學位的學科門類：工學學科專業(yè)名稱：化學工藝論文答辯日期：2014年

2、月日答辯委員會主席：評閱人：2014年月日摘要I摘要本論文是基于適體技術化學發(fā)光檢測生物小分子腺苷的研究，主要以腺苷為研究對象，羧基修飾的磁性微球作為分離載體，通過氨羧反應將適體連接于磁性微球上，再通過堿基配對原則連接上報告序列，由于配體腺苷的競爭作用，導致連接于磁性微球上的化學發(fā)光物質減少，信號減弱，從而間接實現腺苷的檢測。論文通過實驗構建了三種檢測方法，具體實驗方法如下:第一種檢測方法是使用辣根過氧化物酶化學發(fā)光體系檢測。實驗優(yōu)化了

3、羧基修飾的磁性微球、氨基適體、和鏈霉親和素修飾辣根過氧化物酶的量、考察了尿苷、胞苷及鳥苷對腺苷適體的選擇性。結果發(fā)現腺苷濃度在1109molL～10?4molL范圍內，化學發(fā)光信號和腺苷濃度線性關系良好，腺苷的最低檢測濃度達到1pmolL；并對實際尿樣也進行了檢測和回收率實驗，結果表明該法具有一定的可行性；第二種檢測方法采用液溴金納米粒子化學發(fā)光體系檢測，建立了基于適體金納米粒子化學發(fā)光檢測腺苷的新技術，實驗優(yōu)化了羧基修飾的磁性微球、氨

4、基適體、報告序列和金納米粒子標記鏈霉親和素金的量，最后在進行了選擇性實驗后對實際尿樣中的腺苷進行了檢測，此外論文中的金納米粒子是通過檸檬酸鈉還原氯金酸制備的，通過螯合反應制備鏈霉親和素標記金納米粒子。實現化學發(fā)光間接檢測生物小分子腺苷；第三種檢測方法是在上部分研究的基礎上，建立了金納米粒子經羥胺氯金酸體系放大，使魯米諾化學發(fā)光體系發(fā)光的催化能力顯著增大，從而達到提高靈敏度的作用。同樣對實驗中所需反應條件進行了優(yōu)化考察和選擇性實驗。同時在