雞油菌及其伴生真菌研究.pdf

1、雞油菌(CantharellescibariusFr.)俗名黃絲菌、杏菌，是一種著名的外生菌根真菌，它的食用和藥用價(jià)值已經(jīng)得到人們的廣泛認(rèn)可，經(jīng)常食用雞油菌可以防治眼病、抗癌和美容等。目前，人們對(duì)其在維持生態(tài)平衡、環(huán)境監(jiān)測(cè)和促進(jìn)林木生長(zhǎng)等方面的作用十分重視?！　⊥馍婢墚a(chǎn)生植物生長(zhǎng)素及其代謝物，加快根系的生長(zhǎng)發(fā)育，擴(kuò)大根表面積，增加植物對(duì)水分及養(yǎng)分的吸收利用，加快植株生長(zhǎng)；同時(shí)植物為其提供碳水化合物等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。由于特殊的生態(tài)條件

2、、營(yíng)養(yǎng)方式，目前雞油菌尚不能進(jìn)行人工栽培，此外雞油菌子實(shí)體相對(duì)較小，本身有很多伴生微生物，因而獲得其純培養(yǎng)物難度較大。為此，本文對(duì)從雞油菌子實(shí)體中分離到的一株伴生真菌進(jìn)行研究，內(nèi)容包括菌絲體固體培養(yǎng)、液體培養(yǎng)、DNA分子鑒定、雞油菌子實(shí)體和其伴生真菌營(yíng)養(yǎng)成分的對(duì)比分析等，主要研究結(jié)果如下：　　1、雞油菌有很多伴生微生物，本研究從雞油菌子實(shí)體中共分離出4株伴生真菌(LBJ016、LBJ022、LBJ023、LBJ026)和多株細(xì)菌。DN

3、A分子鑒定結(jié)果證明，由上海購(gòu)得的菌種(LBJ027)ITS序列提交NCBI進(jìn)行網(wǎng)上比對(duì)，所得結(jié)果與Xylariasp.相似性最高，結(jié)合其在普通PDA培養(yǎng)基中生長(zhǎng)迅速的特點(diǎn)，認(rèn)為其菌種分離有誤。雞油菌伴生真菌LBJ016ITS序列提交NCBI進(jìn)行網(wǎng)上比對(duì)，所得結(jié)果與Ascomycetesp.或Nectriagliocladioides相似性最高?！　?、雞油菌子實(shí)體和其伴生真菌含有多種功能成分。通過(guò)熒光分光光度法測(cè)定雞油菌子實(shí)體與伴生真

4、菌中維生素A含量，發(fā)現(xiàn)雞油菌子實(shí)體中維生素A含量為14.60mg/100g，伴生真菌LBJ016的維生素A含量為13.54mg/100g，而其余三株含量很低；雞油菌子實(shí)體和伴生真菌LBJ016都含有多種人體必需的礦質(zhì)元素，尤其是人體極易缺乏的微量元素Zn和Fe含量極高，其中雞油菌的含鐵量比LBJ016的要高的多，分別為：雞油菌子實(shí)體1700ug/g，伴生真菌LBJ016294ug/g。而LBJ016含鋅量相當(dāng)于雞油菌的兩倍，雞油菌子實(shí)體

5、76.4ug/g，伴生真菌LBJ016143ug/g；雞油菌子實(shí)體與LBJ016都都含有人體必需氨基酸(不含亮氨酸)，含量最高的均為賴氨酸。LBJ016中每一種氨基酸都是雞油菌含量的兩倍，此外雞油菌與LBJ016都不含有色氨酸。　　3、培養(yǎng)基篩選結(jié)果表明，復(fù)合PDA培養(yǎng)基最適合伴生真菌LBJ016生長(zhǎng)，其次是改良的葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基，查氏培養(yǎng)基最不適應(yīng)LBJ016生長(zhǎng)。另外，松針對(duì)LBJ016的生長(zhǎng)有促進(jìn)作用，但在復(fù)合PDA培養(yǎng)基中是

6、個(gè)例外，原因尚不清楚。　　伴生真菌LBJ016喜中性偏酸環(huán)境，適宜生長(zhǎng)的PH值為5-7，最適PH值是5；對(duì)氮源的利用范圍廣，以蛋白胨最佳，每天菌落直徑的增加3.683m，尿素、硝酸鉀和硝酸鈉都是很好的氮源，其菌落直徑每天以3.200mm、3.575mm和3.125mm增大，對(duì)氨根離子利用不好，如LBJ016以草酸氨和硝酸氨為氮源生長(zhǎng)情況最差，其直徑的日增加量?jī)H為1.925mm和1.842mm；對(duì)碳源的利用研究表明，蔗糖最好，果糖、葡萄

7、糖次之，對(duì)其它碳源利用效果較差，乳糖最差?！　“樯婢鶯BJ016液體純培養(yǎng)的優(yōu)化工藝：通過(guò)單因素條件選擇及正交試驗(yàn)研究了碳源、氮源、礦質(zhì)鹽及維生素對(duì)伴生真菌LBJ016菌絲體生長(zhǎng)的影響，從而確定了伴生真菌LBJ016液體純培養(yǎng)的最佳條件，即：蔗糖2.5％、蛋白胨1.5％、硫酸鎂0.01％、維生素B1(微量)0.005％、土豆汁25％、酵母膏2.5％、pH5，在此條件下菌絲產(chǎn)量最高為2.097g/100ml?！　?、雞油菌子實(shí)體和其

8、伴生真菌LBJ016多糖提取采用熱水浸提法，通過(guò)單因子試驗(yàn)確定了從伴生真菌LBJ016中提取多糖工藝參數(shù)的適宜范圍，通過(guò)正交試驗(yàn)研究了各因素對(duì)雞油菌子實(shí)體和其伴生真菌LBJ016多糖提取率影響的主次順序，確定了最佳提取參數(shù)，研究表明：影響雞油菌子實(shí)體粗多糖提取率的各因素主次順序是木瓜蛋白酶、加水倍數(shù)、溫度和時(shí)間，雞油菌子實(shí)體粗多糖的最佳提取參數(shù)為：溫度為80℃、25倍水、時(shí)間為40min和不加木瓜蛋白酶，此條件下多糖提取率可達(dá)12.59