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文檔簡介
1、分類號(hào):Q9533單位代碼:10114密級(jí):學(xué)號(hào):201010056pcDNA3.1PDGFGALpcDNA3.1PDGFGALpcDNA3.1PDGFGALpcDNA3.1PDGFGAL在在在在Neuro2aNeuro2aNeuro2aNeuro2a細(xì)胞的表達(dá)細(xì)胞的表達(dá)細(xì)胞的表達(dá)細(xì)胞的表達(dá)及其對(duì)細(xì)胞增殖和周期的影響及其對(duì)細(xì)胞增殖和周期的影響及其對(duì)細(xì)胞增殖和周期的影響及其對(duì)細(xì)胞增殖和周期的影響研究生:榮曼指導(dǎo)教師:劉田福教授學(xué)位類型:科
2、學(xué)學(xué)位專業(yè)名稱:動(dòng)物學(xué)研究方向:人類疾病模型所在學(xué)院:基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院二○一三年三月山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文3目錄中文摘要中文摘要..............................................................................................................................................................
3、............................................................................................................................................................................................................................
4、..............................................................................................................................................................................................................1111ABSTRACTAB
5、STRACTABSTRACTABSTRACT......................................................................................................................................................................................................
6、............................................................................................................................................................................................................................
7、..............................................................................................................................................3333插圖、附表清單插圖、附表清單............................................................
8、............................................................................................................................................................................................................................
9、............................................................................................................................................................................................................................
10、....................................5555主要符號(hào)中英文對(duì)照表主要符號(hào)中英文對(duì)照表................................................................................................................................................................
11、............................................................................................................................................................................................................................
12、............................................................................................................6666前言..........................................................................................................
13、......................................7材料和方法..........................................................................................................................................91實(shí)驗(yàn)材料................................
14、..........................................................................................................91.1細(xì)胞:...........................................................................................................
15、...............................91.3主要試劑......................................................................................................................................91.4主要儀器.......................................
16、..............................................................................................121.5主要試劑配制...................................................................................................................
17、.........132實(shí)驗(yàn)方法........................................................................................................................................182.1目的片段PDGFGAL的擴(kuò)增.................................................
18、.................................................182.2重組質(zhì)粒PMDTPDGFGAL的構(gòu)建及鑒定...........................................................................192.3重組表達(dá)質(zhì)粒PCDNA3.1PDGFGAL的構(gòu)建.........................................
19、................................232.4NEURO2A細(xì)胞的常規(guī)培養(yǎng)......................................................................................................252.5細(xì)胞生長曲線的繪制(MTT法)...............................................
20、............................................262.6PCDNA3.1PDGFGAL瞬時(shí)轉(zhuǎn)染NEURO2A(LIPFECTAMIM2000轉(zhuǎn)染試劑)...................262.7建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染小鼠PDGFGAL的NEURO2A細(xì)胞系:........................................................272.8細(xì)胞轉(zhuǎn)錄水平的鑒定(包括
21、瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后和穩(wěn)轉(zhuǎn)單克隆細(xì)胞)...........................................282.9轉(zhuǎn)染后GAL蛋白水平的測定..................................................................................................312.10內(nèi)源性過表達(dá)GAL對(duì)NEURO2A細(xì)胞的增殖分析.................
22、............................................362.11內(nèi)源性過表達(dá)GAL對(duì)NEURO2A細(xì)胞周期的分析.............................................................362.12統(tǒng)計(jì)學(xué)處理..........................................................................
23、....................................................37結(jié)果..............................................................................................................................................381重組質(zhì)粒PMDTPDGFGAL的鑒定.
24、..........................................................................................382重組表達(dá)質(zhì)粒PCDNAPDGFGAL的鑒定.................................................................................383NEURO2A細(xì)胞生長曲線的繪制......
25、............................................................................................394脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染后GAL轉(zhuǎn)錄水平的鑒定.......................................................................................404.1瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后不同時(shí)間段GAL轉(zhuǎn)錄水
26、平測定...........................................................................404.2穩(wěn)轉(zhuǎn)后不同細(xì)胞克隆中轉(zhuǎn)錄水平的鑒定................................................................................415脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染后GAL蛋白表達(dá)水平的鑒定..................
27、.............................................................425.1瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后不同時(shí)間GAL表達(dá)水平......................................................................................425.2細(xì)胞克隆中GAL表達(dá)水平的鑒定................................
28、..........................................................436內(nèi)源性過表達(dá)GAL對(duì)NEURO2A細(xì)胞的增殖分析...................................................................437內(nèi)源性過表達(dá)GAL對(duì)NEURO2A細(xì)胞周期分析..........................................
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