版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、目的:免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)是機(jī)體免疫系統(tǒng)中非常重要的免疫分子,其功能主要是介導(dǎo)體液免疫,傳統(tǒng)的免疫學(xué)理論認(rèn)為,Ig是B淋巴細(xì)胞特有產(chǎn)物,機(jī)體其它細(xì)胞不產(chǎn)生Ig。然而,近年來人們發(fā)現(xiàn)Ig異位表達(dá)于多種上皮源性的惡性腫瘤組織和細(xì)胞系,初步研究表明異位表達(dá)的Ig具有生長(zhǎng)因子樣作用。我們研究小組已對(duì)IgM在多種上皮來源腫瘤組織和細(xì)胞系中的表達(dá)進(jìn)行了報(bào)道,本實(shí)驗(yàn)旨在探討喉鱗癌Hep-2細(xì)胞中IgM蛋白的表達(dá)情況,并對(duì)喉
2、鱗癌Hep-2細(xì)胞表達(dá)IgM蛋白的生物學(xué)活性進(jìn)行初步研究。
方法:進(jìn)行喉鱗癌Hep-2細(xì)胞體外培養(yǎng),分別通過免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)(鏈霉親和素生物素法,SABC法)、免疫印記法(Western blot)以及流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)Hep-2細(xì)胞中IgM蛋白的表達(dá)情況;應(yīng)用抗人IgM抗體,設(shè)置時(shí)間梯度和濃度梯度,通過細(xì)胞增殖抑制試驗(yàn)(MTS法)研究抗人IgM抗體對(duì)喉鱗癌Hep-2細(xì)胞生長(zhǎng)增殖活性的影響,并對(duì)細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行觀察;通過
3、軟瓊脂細(xì)胞集落形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)不同濃度抗人IgM抗體對(duì)Hep-2細(xì)胞增殖能力的影響;通過流式細(xì)胞儀(Annexin V/PI染色)和Hoechst染色方法,研究抗人IgM抗體對(duì)喉鱗癌Hep-2細(xì)胞凋亡的影響,并觀察凋亡細(xì)胞形態(tài);應(yīng)用流式細(xì)胞儀PI染色法觀察抗人IgM抗體對(duì)喉鱗癌Hep-2細(xì)胞細(xì)胞周期的影響。
結(jié)果:免疫細(xì)胞化學(xué)SABC法顯示Hep-2細(xì)胞存在IgM蛋白表達(dá)且主要表達(dá)于細(xì)胞漿中;將Hep-2細(xì)胞的蛋白提取液進(jìn)行免
4、疫印記法檢測(cè),在分子量75KD處檢出了陽性信號(hào),提示Hep-2細(xì)胞存在IgM蛋白的表達(dá);應(yīng)用流式細(xì)胞儀間接免疫熒光法檢測(cè)出Hep-2細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為12.4±2.55,陽性對(duì)照組Raji細(xì)胞熒光強(qiáng)度為17.2±2.30,分別與陰性對(duì)照組熒光強(qiáng)度2.29±0.50比較差異顯著(P<0.05),說明IgM在喉鱗癌Hep-2細(xì)胞中有表達(dá);MTS顯示喉鱗癌Hep-2細(xì)胞的抑制率隨時(shí)間延長(zhǎng)而增高,在第三天開始出現(xiàn)明顯抑制作用,同時(shí)喉鱗癌Hep-2
5、細(xì)胞的抑制率隨濃度增加而增高,在50μg/ml濃度開始出現(xiàn)明顯抑制作用,說明抗人IgM抗體具有時(shí)間和濃度依賴性地抑制喉鱗癌Hep-2細(xì)胞增殖生長(zhǎng)的作用(P<0.05),并使細(xì)胞出現(xiàn)相應(yīng)形態(tài)學(xué)改變;軟瓊脂細(xì)胞集落形成實(shí)驗(yàn)顯示抗人IgM抗體能明顯抑制喉鱗癌Hep-2細(xì)胞的增殖能力,并具有濃度依賴性,與對(duì)照組比較有顯著性差異(P<0.05);抗人IgM抗體能明顯促進(jìn)喉鱗癌Hep-2細(xì)胞凋亡,且使喉鱗癌hep-2細(xì)胞呈現(xiàn)出典型凋亡形態(tài)改變,流式
6、細(xì)胞儀Annexin V/PI染色和hoechst染色方法檢測(cè)Hep-2細(xì)胞凋亡率分別為(20.33±1.93)%和(20.45±3.45)%,與對(duì)照組比較差異顯著(均P<0.05);流式細(xì)胞術(shù)顯示抗人IgM抗體還能影響喉鱗癌Hep-2細(xì)胞的細(xì)胞周期,導(dǎo)致G1期細(xì)胞減少,S期細(xì)胞增多,從而使細(xì)胞周期阻滯于S期(P<0.05)。
結(jié)論:喉鱗癌Hep-2細(xì)胞能夠表達(dá)IgM蛋白,且主要表達(dá)于Hep-2細(xì)胞漿中,抗人IgM抗體能夠
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 抗人IgM抗體對(duì)喉鱗癌Hep-2細(xì)胞裸鼠移植瘤血管生成的影響及機(jī)制研究.pdf
- 喉鱗癌中mir-193b的表達(dá)及其對(duì)Hep-2細(xì)胞增殖的影響.pdf
- 喉鱗癌microRNA表達(dá)譜變化及miR-125b對(duì)喉癌Hep-2細(xì)胞增殖影響的研究.pdf
- 塞來昔布誘導(dǎo)喉癌Hep-2細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期阻滯的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 曲古抑菌素A對(duì)喉鱗癌細(xì)胞株Hep-2細(xì)胞的凋亡作用及相關(guān)分子機(jī)制.pdf
- 阻斷離子通道影響人喉鱗癌Hep-2細(xì)胞增殖、凋亡及RNA編輯酶ADAR 1表達(dá)的體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- Hsa--miR--93--5p對(duì)喉鱗癌Hep--2細(xì)胞增殖和侵襲的影響.pdf
- SD118-2對(duì)人HepG2細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期影響及其作用機(jī)制.pdf
- siRNA抑制Cyclophilin A基因?qū)眵[癌細(xì)胞Hep-2增殖、轉(zhuǎn)移及順鉑敏感性的作用.pdf
- 尼美舒利對(duì)喉鱗癌Hep-2細(xì)胞裸鼠成瘤的影響及機(jī)制研究.pdf
- siRNA抑制cortactin基因表達(dá)對(duì)喉癌Hep-2細(xì)胞增殖和侵襲的影響.pdf
- IL-17對(duì)喉癌細(xì)胞Hep-2的增殖、凋亡和遷移的影響及機(jī)制研究.pdf
- siRNA干擾β-catenin基因?qū)戆〩ep-2細(xì)胞增殖、凋亡和順鉑化療耐藥的影響.pdf
- siRNA干擾CDKs對(duì)細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的影響.pdf
- 川芎嗪對(duì)肝星狀細(xì)胞增殖、凋亡及細(xì)胞周期的影響.pdf
- Beclin1對(duì)喉鱗癌細(xì)胞Hep-2紫杉醇敏感性影響的體外研究.pdf
- 丹參酮ⅡA對(duì)Hela細(xì)胞的細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期的影響.pdf
- 鴉膽子油乳對(duì)Hep-2細(xì)胞增殖抑制及凋亡誘導(dǎo)作用的研究.pdf
- 槲皮素對(duì)人喉鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系Hep-2作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 對(duì)甲酚對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期影響的研究.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論