新生大鼠缺氧缺血性腦損傷Trx、NOS與凋亡的關(guān)系及地塞米松干預效果.pdf

1、目的：制備新生大鼠缺氧缺血性腦損傷(hypoxic-ischemic brain damage，HIBD)動物模型，觀察缺氧缺血性腦損傷后不同時間腦細胞形態(tài)的變化、硫氧還蛋白(thioredoxin，Trx)的表達、一氧化氮合酶(nitricoxjde synthase：NOS)的合成和細胞死亡形式，探討Trx與細胞凋亡的關(guān)系，NOS與細胞凋亡的關(guān)系及Trx與NOS的關(guān)系，為缺氧缺血性腦病提供實驗和理論依據(jù)。觀察地塞米松對NOS、Trx

2、和凋亡的影響，以揭示地塞米松與Trx和NOS的相關(guān)性。 方法：7日齡SD大鼠45只，雌雄不限，體重12-18g，隨機分為9組，對照組、實驗組和給藥組(每一組又細分為缺氧缺血后3h、24h和72h組，每組各5只)，實驗組動物采用阻斷左頸總動脈后置于含8％O<,2>的低氧環(huán)境中2小時，建立缺氧缺血性腦損傷動物模型。根據(jù)實驗設(shè)計取各組新生大鼠腦組織，通過HE染色和脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導的缺口末端標記法(terminal-deox

3、ynucleotidyl transferase mediated nick end labeling，TUNEL)在光鏡下觀察腦組織的病理改變，通過rtPCR測定Trx的表達，通過紫外分光光度計測定NOS的含量，通過Tunel試劑盒測定細胞凋亡。給藥組于造模前24小時給予地塞米松腹腔注射。對照組麻醉切開頸部皮膚，不結(jié)扎左頸總動脈。 結(jié)果：正常腦組織可以觀察到凋亡細胞，可以檢測到Trx和NOS，但無明顯時間變化規(guī)律。凋亡于缺氧缺

4、血后3小時升高，24小時達高峰，72小時下降，與對照組相比有統(tǒng)計學意義。Trx的表達也于缺氧缺血后3小時升高，24小時達高峰，72小時下降，與對照組比較這種差別均有統(tǒng)計學意義。NOS的含量的變化趨勢與凋亡和Trx相同。凋亡、Trx和NOS之間無相關(guān)關(guān)系。地塞米松可以使凋亡減輕、Trx的表達和INOS的合成下降。 結(jié)論：NOS、Trx與凋亡均于缺氧缺血后3小時升高，24小時達高峰，72小時下降，為臨床干預時間和干預目標提供了一定的