一氧化氮傳感針的研制及其在體測定研究.pdf

1、自1986年NO被證實為血管內(nèi)皮舒張因子(EDRF)以來，大量研究結(jié)果表明，NO是重要的生物信使分子，對生物體的生理過程起著重要的調(diào)節(jié)作用，因此，建立快速準確的NO測定方法不僅能從本質(zhì)上揭示某些生理現(xiàn)象，也為探索相關(guān)疾病的監(jiān)控和病理研究提供技術(shù)保障。由于NO的易逸性且不穩(wěn)定(半衰期約為5～60S,易被氧化)，使其測定非常困難?，F(xiàn)已報道的檢測生物體系中NO的方法有化學發(fā)光法、電子自旋共振光譜法、紫外可見及熒光光譜法、Greiss反應(yīng)分析法

2、和電化學測定法等。僅電化學測定法與傳感器相結(jié)合可以實現(xiàn)在體測定，其中電極有不同類型的化學修飾，常見的電極修飾材料有金屬卟啉類化合物、金屬酞菁類化合物、席夫堿金屬配合物及其它如鄰苯二胺類高分子材料和納米材料等,本文研制了兩種不同敏感膜NO傳感針，通過離體性能測試，與NO試劑盒在體測試結(jié)果進行的比較，認為NO傳感針可進行在體測定。 (一) 一氧化氮傳感針的研制與性能比較。 選用機械強度高、化學穩(wěn)定性好的鉑絲為基體電極,在其表面

3、修飾一層在生理pH 條件下帶正電的脫乙酰甲殼素(chitosan，CTS) 膜,經(jīng)NiSO4溶液處理后,再修飾一層Nafion 膜,可有效地防止陰離子型及陽離子型干擾物質(zhì)的影響，采用循環(huán)伏安法，用該傳感針在掃描電壓為600mV到-1000mV范圍內(nèi)測定NO標準溶液，線性范圍為6.25×10-7～1.0×10-4mol/L，R2=0.9944。該傳感針有好的選擇性、重現(xiàn)性（RSD<5％）,能滿足生理分析的要求。 采用催化氧化法，采

4、用鉑絲作為工作電極，分別經(jīng)磺化酞菁鈷（CoTSPc）和四丁基高氯酸銨(TBAP)的DMSO溶液、Nafion膜的修飾后，通過測定NO進行比較，從中找到最優(yōu)修飾方法，制備出NO傳感針。該傳感針的修飾條件是以0.05mol/L TBAP,2.5×10-3mol/L CoTSPC為底液在掃描電壓-300到1300mV內(nèi)循環(huán)掃描60圈后，在0.5％Nafion中浸泡15s和烘烤兩次，線性范圍為1×10-7～1.0×10-4mol/L，R2=0.

5、9979。該傳感針具有好的選擇性、重現(xiàn)性（RSD<5％）,能滿足生理分析的要求。 研制的兩種NO傳感針都屬于電催化氧化類化學工作電極，都是與NO在軸向形成配合物，配合物比處于溶液中的NO更容易發(fā)生電化學氧化，主要是因為其在電極表面降低了NO電化學氧化的活化能。對兩種NO傳感針的幾項性能作了比較，分析了各NO傳感針的優(yōu)劣。 (二)NO傳感針與NO試劑盒在體測試比較與在體應(yīng)用。 用兩種NO傳感針和NO試劑盒來觀察大鼠血