一氧化氮（NO）產(chǎn)生菌的篩選及其產(chǎn)NO特性的研究.pdf

1、一氧化氮(NO)是一種無(wú)機(jī)小分子，普遍存在于動(dòng)物、植物和微生物細(xì)胞內(nèi)<'[1，5]>。長(zhǎng)期以來(lái)，人們只知道NO是一種環(huán)境污染物，污染空氣，形成酸雨，破壞臭氧層，NO對(duì)人類的危害引起全球的關(guān)注；卻從未認(rèn)識(shí)到這小小的氣體分子在生物體內(nèi)發(fā)揮著不容忽視的作用。近期研究表明，NO是一種生物活性分子，它是一種普遍存在于原生動(dòng)物、細(xì)菌、酵母、動(dòng)植物中的信號(hào)分子口，引。NO在哺乳動(dòng)物和植物中的重要作用，前人有不少的研究，但對(duì)原核微生物產(chǎn)NO有關(guān)方面的研

2、究卻鮮有報(bào)道。本項(xiàng)試驗(yàn)通過(guò)多種方法，對(duì)土壤中NO產(chǎn)生菌進(jìn)行篩選，并對(duì)NO產(chǎn)生菌生長(zhǎng)、生理特征進(jìn)行了測(cè)定，同時(shí)初步研究了NO產(chǎn)生菌NO產(chǎn)生機(jī)制及其在土壤環(huán)境中對(duì)土壤細(xì)菌生物量可能產(chǎn)生作用。主要結(jié)果如下： 1．采用不同的培養(yǎng)基和培養(yǎng)方式，從土壤、活性污泥中獲得了近400株細(xì)菌純菌株。利用本實(shí)驗(yàn)室與美國(guó)康乃爾大學(xué)合作構(gòu)建gfp菌株來(lái)篩選NO產(chǎn)生菌，得到NO產(chǎn)生菌66株，去掉其中的反硝化細(xì)菌后得到非反硝化的NO產(chǎn)生菌10株。 2

3、．溫度和pH等環(huán)境因素及NO合成前體物質(zhì)L-精氨酸對(duì)NO產(chǎn)生菌產(chǎn)NO的能力有顯著影響。在NO產(chǎn)生菌的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，溫度和pH對(duì)它的影響最為明顯，在30℃和pH7.5的條件下，B30生長(zhǎng)最快，同時(shí)產(chǎn)出NO的量也最大。說(shuō)明B30在生長(zhǎng)最快的時(shí)間段也是產(chǎn)生NO最多的時(shí)期段。 3．利用4種一氧化氮酶(NOS)抑制劑分析金黃桿菌B30產(chǎn)NO機(jī)制，結(jié)果表明，L-NMMA(總NOS抑制)和Spermidine(nNOS抑制劑)對(duì)金黃桿菌屬的NO