急性髓性白血病中RIZ1表達(dá)的改變及其表觀遺傳機(jī)制的研究.pdf

1、[目的]
　　 觀察急性髓性白血?。ˋML）患者中RIZ1基因的表達(dá)狀況及該基因啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)，探討兩者變化的相關(guān)性及其與急性髓性白血病發(fā)病的關(guān)聯(lián)，為全面認(rèn)識(shí)急性髓性白血病的發(fā)病機(jī)制提供一定的分子生物學(xué)依據(jù)，并為急性髓性白血病的進(jìn)一步診斷及靶向治療提供相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 [方法]
　　 1.收集急性髓性白血病病人（試驗(yàn)組）及健康人（正常對(duì)照組）外周血標(biāo)本，并收集病人的臨床資料。病人均為自2008年9月至20

2、09年11月期間在東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院血液科就診的未用藥治療過(guò)的初發(fā)的急性髓性白血病病人，其中男性24例，女性19例，平均年齡為45歲。按FAB標(biāo)準(zhǔn)分型：M15例，M212例，M38例，M43例，M511例，M64例，共計(jì)43例，作為試驗(yàn)組。20例健康人作為正常對(duì)照組，平均年齡為36歲。
　　 2.運(yùn)用半定量RT-PCR法檢測(cè)急性髓性白血病病人與健康人外周血標(biāo)本中RIZ1基因mRNA的表達(dá)狀況，結(jié)合病人的臨床資料分析結(jié)果。

3、>　　 3.應(yīng)用甲基化特異性PCR（methylation specific PCR，MSP）檢測(cè)急性髓性白血病病人與健康人外周血標(biāo)本RIZ1基因啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)，基因測(cè)序核實(shí)，結(jié)合病人的臨床資料分析結(jié)果，并結(jié)合半定量RT-PCR法檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析。
　　 [結(jié)果]
　　 1.RT-PCR結(jié)果顯示初診的急性髓性白血病病人和健康人外周血標(biāo)本中RIZ1mRNA相對(duì)含量的平均值分別為0.48±0.03；0.79±0.04。與

4、健康人比較，急性髓性白血病病人RIZ1 mRNA的相對(duì)含量明顯降低（P<0.05），其中39.5％（17/43）的病人RIZ1mRNA表達(dá)下降。急性髓性白血病病人RIZ1 mRNA表達(dá)狀況與患者的性別、年齡、外周血白細(xì)胞數(shù)、骨髓原始細(xì)胞及（早）幼細(xì)胞數(shù)百分比均無(wú)相關(guān)性（均為P>0.05）。
　　 2.43例急性髓性白血病病人外周血標(biāo)本中，13例存在RIZ1基因啟動(dòng)子甲基化，MSP陽(yáng)性率為30.2％（13/43）。該13例RIZ1

5、基因啟動(dòng)子甲基化的標(biāo)本同時(shí)存在RIZ1mRNA表達(dá)降低。健康人標(biāo)本未發(fā)現(xiàn)RIZ1基因啟動(dòng)子甲基化。基因測(cè)序反映MSP檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確。急性髓性白血病病人RIZ1基因啟動(dòng)子甲基化與患者性別、年齡、外周血白細(xì)胞數(shù)、骨髓原始細(xì)胞及（早）幼細(xì)胞數(shù)百分比均無(wú)相關(guān)性（均為P>0.05）。
　　 3.RIZ1 mRNA表達(dá)下降的急性髓性白血病人中，RIZ1啟動(dòng)子甲基化占76.5％（13/17）。13例RIZ1啟動(dòng)子甲基化的病人RIZ1 mRNA表

6、達(dá)水平為0.30±0.02，而30例RIZ1啟動(dòng)子未甲基化的病人RIZ1 mRNA表達(dá)水平為0.56±0.03，表明急性髓性白血病人RIZ1啟動(dòng)子甲基化時(shí)mRNA表達(dá)水平低于啟動(dòng)子未甲基化者（P<0.05）。
　　 [結(jié)論]
　　 1.急性髓性白血病病人存在RIZ1mRNA的表達(dá)降低現(xiàn)象，RIZ1基因的表達(dá)下降與急性髓性白血病的發(fā)生有關(guān)。
　　 2.急性髓性白血病病人存在RIZ1基因啟動(dòng)子甲基化現(xiàn)象，RIZ1基因