多發(fā)性骨髓瘤患者4-1BBL分子表達(dá)及功能的研究-自體造血干細(xì)胞移植治療多發(fā)性骨髓瘤27例療效分析.pdf

1、第一部分多發(fā)性骨髓瘤患者表達(dá)4-1BBL分子及功能的研究
　　 [目的]
　　 (1)研究多發(fā)性骨髓瘤(MM)細(xì)胞表面4-1BBL分子的表達(dá)情況。
　　 (2)探討4-1BBL逆向信號(hào)對(duì)人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株U266的促生長(zhǎng)作用及其機(jī)制。
　　 [方法]
　　 (1)采用免疫熒光標(biāo)記和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)骨髓瘤細(xì)胞表面4-1BBL分子的表達(dá)；
　　 (2)采用抗人4-1BBL單克隆抗體1F1激發(fā)4

2、-1BBL逆向信號(hào)，細(xì)胞計(jì)數(shù)及MTT法觀察U266細(xì)胞的增殖；
　　 (3)碘化丙錠單染法，檢測(cè)1F1作用后細(xì)胞周期各期分布比例的變化；
　　 (4)采用細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子染色法，檢測(cè)1F1作用后U266細(xì)胞合成白細(xì)胞介素-6（IL-6）的改變；
　　 (5)利用中和性抗體阻斷IL-6的生物學(xué)作用，觀察IL-6是否參與了4-1BBL逆向信號(hào)對(duì)U266細(xì)胞的促增殖作用；
　　 (6)采用MTT法檢測(cè)硼替佐米對(duì)1

3、F1促U266細(xì)胞增殖作用的影響。
　　 [結(jié)果]
　　 (1)20例MM患者細(xì)胞表面均組成性高表達(dá)4-1BBL分子，人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株（U266、OPM-2、MY-5、KMS-11、LP-1）均組成性高表達(dá)4-1BBL分子；
　　 (2)1F1激發(fā)U266細(xì)胞表面4-1BBL逆向信號(hào)后，細(xì)胞計(jì)數(shù)及MTT實(shí)驗(yàn)均表明單抗1F1明顯促進(jìn)U266細(xì)胞系生長(zhǎng)；
　　 (3)U266細(xì)胞周期各期分布比例發(fā)生變化，

4、G1期細(xì)胞減少，S期細(xì)胞增多，表明單抗1F1促進(jìn)U266細(xì)胞從G1期向S期轉(zhuǎn)換；
　　 (4)細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子染色示1F1促進(jìn)U266自分泌IL-6增多；
　　 (5)中和IL-6能夠抑制單抗1F1對(duì)U266細(xì)胞的促增殖作用；
　　 (6)硼替佐米能夠抑制單抗1F1對(duì)U266細(xì)胞的促增殖作用。
　　 [結(jié)論]
　　 MM患者原代細(xì)胞及細(xì)胞株表面均組成性高表達(dá)4-1BBL分子；4-1BBL逆向信號(hào)通過(guò)

5、增加IL-6的產(chǎn)生，促進(jìn)U266細(xì)胞的增殖；硼替佐米能夠抑制單抗IF1對(duì)U266細(xì)胞促增殖作用；4-1BB/4-1BBL分子可能是對(duì)MM進(jìn)行免疫干預(yù)的重要靶點(diǎn)。
　　 第二部分自體造血干細(xì)胞移植治療多發(fā)性骨髓瘤27例療效分析
　　 [目的]
　　 評(píng)價(jià)自體造血干細(xì)胞移植(ASCT)治療MM的療效以及影響其療效的因素。
　　 [方法]
　　 回顧性分析自2004年5月至2011年8月間在我院接受AS

6、CT治療的27例MM患者的臨床資料，并與同期獲得良好部分緩解(VGPR)或以上緩解而未接受ASCT的28例患者進(jìn)行比較，分析ASCT對(duì)緩解程度、無(wú)進(jìn)展生存(PFS)和總生存(OS)時(shí)間的影響以及ASCT后患者的相關(guān)預(yù)后因素。
　　 [結(jié)果]
　　 所有患者移植后造血均順利重建，無(wú)移植相關(guān)死亡。移植后完全緩解(CR)率由移植前的25.9％提高到70.4%(P＜0.01)。ASCT組、非ASCT組預(yù)期4年P(guān)FS率分別為(64

7、.9±11.1)%（未達(dá)中位PFS時(shí)間）和(26.9±11.7)%（中位PFS時(shí)間為20個(gè)月）(P＜0.05)。ASCT組、非ASCT組預(yù)期5年OS率分別為(52.2±15.7)%（未達(dá)中位OS時(shí)間）和(33.1+24.2)%（中位OS時(shí)間為60個(gè)月）(P＞0.05)。ASCT組相關(guān)預(yù)后因素分析發(fā)現(xiàn)移植后是否接受維持／鞏固治療與PFS(P=0.01)及OS(P＜0.01)密切相關(guān)；接受以硼替佐米為主的方案誘導(dǎo)治療，緩解后早期行自體移植，