骨碎補(bǔ)總黃酮局部填充修復(fù)家兔膝關(guān)節(jié)軟骨全層缺損的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究局部運(yùn)用中藥提取物骨碎補(bǔ)總黃酮填充修復(fù)健康成年家兔膝關(guān)節(jié)關(guān)節(jié)軟骨全層缺損的可行性和部分作用機(jī)理。
　　方法：選擇成年健康新西蘭家兔72只，隨機(jī)分為三組，每組各24只48個(gè)關(guān)節(jié)，其中A組為實(shí)驗(yàn)組，B組為觀察組、C組為對(duì)照組。參照目前國(guó)內(nèi)比較公認(rèn)的王立春關(guān)節(jié)軟骨缺損造模法，沿膝關(guān)節(jié)內(nèi)側(cè)髕骨內(nèi)側(cè)緣做皮膚切口，逐層切開顯露膝關(guān)節(jié)，顯露股骨內(nèi)髁關(guān)節(jié)面，用限制鉆頭鉆孔在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物膝關(guān)節(jié)股骨內(nèi)髁滑車面上做一直徑3mm、深3mm的軟骨全層

2、缺損區(qū)，直至軟骨下骨滲血。沖洗關(guān)節(jié)腔及軟骨缺損區(qū)后，三組分別給予不同的填充處理，其中A組予以骨碎補(bǔ)總黃酮凝膠、B組予以明膠/骨形態(tài)發(fā)生蛋白復(fù)合物凝膠填充，C組予以明膠凝膠填充，作空白對(duì)照。于造模術(shù)后2、4、8周分別取8只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的膝關(guān)節(jié)造模標(biāo)本行大體觀察、HE和甲苯胺藍(lán)染色、改良Pineda法組織學(xué)評(píng)分[2]、Ⅱ型膠原免疫組化和原位雜交方法、檢測(cè)IL-1和TNF-α的表達(dá)水平并進(jìn)行評(píng)估。
　　結(jié)果：經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，A組骨碎補(bǔ)總黃酮組和

3、B組明膠/BMP復(fù)合物組在造模術(shù)后的第2周、第4周、第8周缺損區(qū)填充均優(yōu)于明膠組，為乳白色質(zhì)軟類透明軟骨組織；組織學(xué)評(píng)分與明膠組存在極顯著性差異（P<0.01），用藥組之間沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。關(guān)節(jié)軟骨缺損區(qū)修復(fù)組織經(jīng)Ⅱ型膠原免疫組化、原位雜交檢測(cè)定性。用藥組Ⅱ型膠原的表達(dá)在術(shù)后2、4、8周與明膠組比較，均有極顯著性差異（P<0.01），用藥組之間比較沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。用藥組IL-1水平在術(shù)后第4周、第8周與術(shù)后

4、2周比較明顯改變（P<0.01），兩組均在4周時(shí)明顯上升，在術(shù)后第8周發(fā)現(xiàn)，骨碎補(bǔ)總黃酮組IL-1水平較術(shù)后第4周的水平明顯下降，而此時(shí)明膠/BMP組則較術(shù)后第4周水平繼續(xù)增高。用藥組TNF-α水平在術(shù)后第2周顯著上升達(dá)到最高峰，隨后不斷下降，在術(shù)后第4周、第8周，兩用藥組TNF-α較術(shù)后第2周的水平明顯下降（P<0.01），與明膠組無明顯區(qū)別（P＞0.05）。
　　結(jié)論：骨碎補(bǔ)總黃酮局部運(yùn)用可以填充修復(fù)家兔膝關(guān)節(jié)軟骨缺損，可能是