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1、1.本研究利用PCR-斑點雜交和巢式PCR法檢測野外發(fā)病對蝦養(yǎng)殖池塘中橈足類及其休眠卵,以及由這些休眠卵孵化出的幼體攜帶病毒情況,發(fā)現(xiàn)橈足類由卵到成體各階段中均有陽性個體,而且池塘中在春天放養(yǎng)對蝦苗前橈足類就出現(xiàn)陽性個體。顯示橈足類很可能是WSSV中間宿主和傳播媒介,其休眠卵可能起到隔冬傳播WSSV的作用。 2.分離池塘底泥中橈足類的休眠卵,進行孵化并培養(yǎng),初步掌握了其中一種橈足類(克氏紡錘水蚤Acartiaclausi)的培養(yǎng)
2、條件和部分生物學(xué)特性,并進行了純化培養(yǎng),為進一步研究病毒傳播途徑提供充足的實驗材料。 3.為證實攜帶WSSV的橈足類能否對養(yǎng)殖對蝦起致病作用,用病毒粗提液浸泡和投喂兩種方法分別對克氏紡錘水蚤進行人工感染,并用感染橈足類進行凡納濱對蝦投喂實驗。巢式PCR檢測發(fā)現(xiàn)浸泡攻毒克氏紡錘水蚤沒有感染效果,投喂攻毒效果明顯,而且用感染病毒的橈足類投喂對蝦實驗中對蝦幾乎全部檢測為WSSV陽性。證明橈足類可以攜帶WSSV并作為傳播媒介。另外從帶毒
3、橈足類所產(chǎn)的休眠卵及其孵化的幼體中也檢測到WSSV陽性,顯示橈足類休眠卵極可能是傳播WSSV的載體和途徑。 4.通過對橈足類及其休眠卵感染W(wǎng)SSV的調(diào)查及人工感染實驗,證明了WSSV可以經(jīng)口感染橈足類,并進而通過攝食途徑感染對蝦。橈足類休眠卵很可能是一種潛在的導(dǎo)致WSSV在世代間進行傳播的媒介,攜帶WSSV的橈足類可造成對蝦感染。實驗結(jié)果顯示,對蝦養(yǎng)殖生產(chǎn)中,傳統(tǒng)的清池方法不能有效切斷WSSV的傳播途徑,這是導(dǎo)致WSS在一些對蝦
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