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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:探討他克林的肝損傷機(jī)理及人參皂苷的活性篩選。
方法:①首先通過體外實(shí)驗(yàn)確定他克林對(duì)HepG-2的毒性作用,計(jì)算出半數(shù)抑制濃度IC50;②給不同濃度的他克林作用于HepG-2,收集細(xì)胞提取線粒體蛋白,做Western Blotting實(shí)驗(yàn),考察相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)情況;③用 MTT法測(cè)定原人參二醇(PPD)、原人參三醇(PPT)、人參二醇(PD)、人參三醇(PT)對(duì)肝癌細(xì)胞(HepG-2)、肝星狀細(xì)胞(t-HSC)、正常肝細(xì)胞
2、(Chang liver)活力的影響。
結(jié)果:他克林作用后,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞線粒體膜上的Bax和Bid的表達(dá)明顯增加,并且隨著濃度的增加而增多,Cyto C則從線粒體釋放進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)中,表達(dá)減少;原人參三醇、人參二醇、人參三醇對(duì)不同肝細(xì)胞的毒性很小,而原人參二醇對(duì)不同肝細(xì)胞的毒性較大,尤其是在高濃度時(shí)。
結(jié)論:他克林是通過線粒體引起細(xì)胞凋亡;原人參二醇高濃度時(shí)對(duì)細(xì)胞的毒性較大,原人參三醇、人參二醇、人參三醇對(duì)細(xì)胞幾乎沒有毒性。
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