豬繁殖與呼吸綜合征病毒的檢測與流行病學研究.pdf

1、　　豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)是目前造成養(yǎng)豬業(yè)嚴重經(jīng)濟損失的重要病原。PRRSV屬于動脈炎病毒科，為單股、正鏈RNA病毒。血清型分為歐洲型和美洲型。美洲型PRRSV基因組具有高度的變異性，具有多種基因亞型。本研究主要包括以下幾方面內容：　　1、PRRSVRT-PCR檢測方法的建立：運用3對分別針對PRRSV的ORF7、ORF5和ORF5的PCR引物N1/N2、AdGP5.1/AdGP5.2和RFLP5.1/RFLP5.2進行

2、RT-PCR，檢測PRRSV，從其敏感性、特異性和臨床樣品檢出率等方面進行比較，在此基礎上進一步建立一步法RT-PCR檢測方法。該結果表明，用N1/N2引物擴增PRRSV目的基因，其敏感性和臨床樣品檢出率更高，更適合臨床樣品PRRSV的檢測?！　?、PRRSV流行病學研究：應用N1/N2引物，通過RT-PCR方法對來自129家豬場的271份臨床病料進行了PRRSV檢測，共鑒定出166份PRRSV陽性病料，分別來自85家豬場。以病料統(tǒng)計

3、，陽性率為61.2﹪(166/271)，其中安徽、江蘇和上海的陽性率較高，2002年至2005年PRRSV陽性率分別為：74.4﹪、65.6﹪、57.0﹪和38.1﹪。并通過問卷調查的方式收集了每份送檢病料流行病學方面的數(shù)據(jù)?！　?、本文用AdGP5.1/AdGP5.2引物，通過RT-PCR方法對鑒定的166份病料中PRRSVORF5基因進行了擴增，運用MluⅠ、HincⅡ和SacⅡ三種限制性內切酶對PCR擴增片段進行限制性片段長度多