華南地區(qū)豬繁殖與呼吸綜合征病毒分子流行病學(xué)及HY毒株分離鑒定研究.pdf

1、豬繁殖與呼吸綜合征是對(duì)養(yǎng)豬業(yè)危害很大的傳染性疾病。本研究旨在了解我國(guó)華南地區(qū)豬繁殖與呼吸綜合征的流行現(xiàn)狀及病毒的遺傳變異情況，并確定流行毒株分型地位，為防控該病提供理論依據(jù)。本篇論文調(diào)查和研究的內(nèi)容主要分為以下幾個(gè)部分：
　　1、華南地區(qū)PRRS流行病學(xué)調(diào)查及ORF5和Nsp2基因遺傳進(jìn)化分析
　　對(duì)2015年期間華南及其附近地區(qū)PRRSV血清學(xué)和分子流行情況進(jìn)行了調(diào)查和分析。結(jié)果顯示：華南地區(qū)各區(qū)域抗體陽性率差異不顯著，不

2、同階段豬抗體陽性率差異不顯著，不同月份差異也不顯著，但抗體陽性率均高于60％。抗原檢測(cè)結(jié)果顯示：華南及周邊地區(qū)PRRSV抗原檢測(cè)均有陽性，但不同地區(qū)的PRRSV抗原陽性率有所差異；本實(shí)驗(yàn)18個(gè)毒株的Nsp2區(qū)域部分測(cè)序氨基酸序列比對(duì)結(jié)果顯示：有16個(gè)變異較少，與毒株JXA1相似，其氨基酸同源性為91.4%~97.5%；有1個(gè)與QYYZ相似，其氨基酸同源性為88.9%；有1個(gè)在470aa~515aa處存在44個(gè)氨基酸連續(xù)缺失，其氨基酸同源

3、性較高的是CH-1a(80.1%)；本研究所測(cè)得18個(gè)毒株ORF5序列有16個(gè)位于以JXA1為代表的高致病性毒株分支，其氨基酸同源性95.0%~99.5%；有2個(gè)位于以VR-2332和CH-1a為代表的大的分支下面的一個(gè)小分支，與我國(guó)的QYYZ毒株相近，其氨基酸同源性分別為95.0%和96.0%。
　　2、華南地區(qū)種公豬PRRSV分子流行病學(xué)調(diào)查分析
　　采用ELISA診斷試劑盒和RT-PCR方法對(duì)來自華南及周邊地區(qū)的種豬場(chǎng)

4、的367份種公豬血清進(jìn)行抗原抗體檢測(cè)，對(duì)66份陽性樣品的Nsp2和ORF5基因進(jìn)行擴(kuò)增，測(cè)序以及遺傳進(jìn)化分析。結(jié)果顯示：華南地區(qū)的廣東省和廣西省的28個(gè)場(chǎng)的332份血清樣品，有23個(gè)場(chǎng)217份抗體陽性，10個(gè)場(chǎng)66份抗原陽性；福建省和浙江省3個(gè)場(chǎng)35份血清，有1個(gè)場(chǎng)9份抗體陽性，0個(gè)抗原陽性；66個(gè)Nsp2序列推導(dǎo)的氨基酸序列有2個(gè)是在介于VR2332和CH-1a之間的分支，其余64個(gè)在以JXA1為代表的高致病性毒株分支，其氨基酸同源性

5、最低為77.4%，最高為98.1%；66個(gè)ORF5序列推導(dǎo)的氨基酸序列均在以JXA1為代表的高致病性毒株分支，其氨基酸同源性最低為93.0%，最高為98.5%。
　　3、豬藍(lán)耳病病毒HY毒株的分離純化及全基因組測(cè)序分析
　　為了更加深入地了解華南地區(qū)PRRSV流行毒株的情況，本試驗(yàn)利用噬斑純化出HY毒株，對(duì)其全基因序列分段擴(kuò)增，最后將其與國(guó)內(nèi)外分離的毒株進(jìn)行核苷酸序列對(duì)比分析。結(jié)果顯示：HY株與歐洲株Lelystad vir