西維來(lái)司鈉對(duì)球囊損傷后Wistar大鼠動(dòng)脈中膜遷徙平滑肌細(xì)胞mRNA表達(dá)的研究.pdf

1、目的： 在動(dòng)脈粥樣硬化形成的過(guò)程中，中膜遷徙平滑肌細(xì)胞向內(nèi)膜遷徙并在內(nèi)膜增殖是極其重要的現(xiàn)象。球囊導(dǎo)管所致的動(dòng)脈損傷和內(nèi)膜肥厚的發(fā)生機(jī)制中，中膜平滑肌細(xì)胞的損傷是關(guān)鍵。本研究擬利用球囊損傷Wistar大鼠動(dòng)脈模型，追蹤損傷動(dòng)脈中膜遷徙平滑肌細(xì)胞mRNA隨時(shí)間變化的表達(dá)及西維來(lái)司鈉對(duì)這一過(guò)程及其相關(guān)因素的影響，探討西維來(lái)司鈉對(duì)損傷動(dòng)脈的中膜遷徙平滑肌細(xì)胞mRNA影響程度與內(nèi)膜肥厚的關(guān)系。 方法： 選用60只Wist

2、ar大鼠(雄性，12周，250g±20g)，將它們的頸總動(dòng)脈用球囊導(dǎo)管損傷做成損傷模型，隨機(jī)法分成對(duì)照組，持續(xù)給藥組，5日止給藥組和5日始給藥組共四組，除5日始給藥組外，其他三組分別于術(shù)前一天開(kāi)始投藥，對(duì)照組給與生理鹽水，5日止給藥組和持續(xù)給藥組給與西維來(lái)司鈉鹽溶液，5日始給藥組在術(shù)后第5天給西維來(lái)司鈉鹽溶液。除5日止給藥組于第5天停藥，其余三組于術(shù)后14天停藥。四組術(shù)后于1、3、5、7、14天分批處死大鼠。處死前30分鐘，按50mg/

3、kg體重靜脈注射5-Bromodeoxyuridine(BrdU)。然后應(yīng)用大鼠胰腺?gòu)椥缘鞍酌涪虻目寺?，原位雜交與免疫組化雙重染色，測(cè)定動(dòng)脈損傷后各時(shí)期給藥中膜BrdU標(biāo)記彈性蛋白酶mRNA在動(dòng)脈中膜平滑肌細(xì)胞表達(dá)的陽(yáng)性細(xì)胞率。同時(shí)進(jìn)行內(nèi)膜-中膜厚度/內(nèi)徑比的測(cè)定。 結(jié)果： 對(duì)照組BrdU標(biāo)記mRNA表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞率在1-5天增高明顯，以后逐漸下降。持續(xù)給藥組，5日止給藥組BrdU標(biāo)記mRNA表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞率在1-5天增高緩

4、慢，與對(duì)照組相比存在明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；而持續(xù)給藥組與5日止給藥組相比無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；5日始給藥組在1-5天出現(xiàn)峰性增高，5天后下降，與對(duì)照組無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。在內(nèi)膜-中膜厚度/內(nèi)徑比的測(cè)定上，持續(xù)給藥組和5日止給藥組測(cè)定比值低于對(duì)照組，且與對(duì)照組有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，5日始給藥組與對(duì)照組在測(cè)定比值上無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 結(jié)論： 對(duì)照組BrdU標(biāo)記mRNA表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞率在1-5天增高明顯，說(shuō)明損傷后5日內(nèi)為動(dòng)脈中膜遷徙性平滑肌細(xì)

5、胞增殖的時(shí)期，可以稱之為增殖期。持續(xù)給藥組，5日止給藥組BrdU標(biāo)記mRNA表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞率在1-5天增高緩慢，說(shuō)明西維來(lái)司鈉通過(guò)抑制彈性蛋白酶，從而抑制中膜遷徙性平滑肌細(xì)胞的增殖，使持續(xù)給藥組與5日止給藥組mRNA表達(dá)減弱；而持續(xù)給藥組與5日止給藥組相比無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，說(shuō)明西維來(lái)司鈉全程用藥和損傷后5日內(nèi)用藥效果相同，進(jìn)一步說(shuō)明該藥主要作用于損傷后5日內(nèi)，即增殖期用藥。5日始給藥組在1-5天出現(xiàn)峰性增高，5天后下降，與對(duì)照組無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)