瘦素mRNA及其蛋白質(zhì)在酒精性脂肪肝中的表達(dá).pdf

1、為深入研究瘦素(1eptin)在酒精性脂肪肝中的表達(dá)，探索其在這種疾病中的發(fā)病作用，本研究通過(guò)生理方式喂食酒精建立大鼠酒精性脂肪肝模型，并采用分光光度法、ELISA法測(cè)定相關(guān)酶的活性及利用RT-PCR和免疫組化法檢測(cè)1eptinmRNA和蛋白在模型中的表達(dá)。結(jié)果表明：1.通過(guò)生理方式喂食酒精建立大鼠酒精性脂肪肝模型，由病理分析可知：酒精組大鼠肝小葉內(nèi)均出現(xiàn)大量的脂肪變性以及細(xì)胞水腫癥狀(中度以上)，且在匯管區(qū)域伴有少量炎細(xì)胞浸潤(rùn)和部分點(diǎn)

2、狀壞死；酒精組肝系數(shù)高于對(duì)照組和正常組，說(shuō)明酒精性脂肪肝模型已建立。 2.應(yīng)用分光光度法測(cè)定血漿中與肝細(xì)胞損傷相關(guān)酶(AST、ALT)的活性及ELISA法測(cè)定血漿中TNF-a和1eptin含量，結(jié)果表明：酒精組血漿ALT、AST均高于對(duì)照組和正常組；同時(shí)酒精組TNF-a和leptin含量也高于對(duì)照組和正常組。 3.應(yīng)用分光光度法測(cè)定10％的肝勻漿中的谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)含量

3、，結(jié)果表明：酒精組肝勻漿中GSH和SOD活性逐漸下降，MDA含量卻逐漸升高。 4.采用免疫組化法測(cè)定酒精組肝組織leptin蛋白分布及表達(dá)。免疫組化染色顯示：酒精組的枯否氏細(xì)胞(KC)呈陽(yáng)性，主要以核內(nèi)表達(dá)為主，此外少量肝細(xì)胞以及匯管區(qū)內(nèi)肝纖維化細(xì)胞也呈陽(yáng)性。 5.通過(guò)RT-PCR法檢測(cè)leptinmRNA在肝組織中的表達(dá)，結(jié)果顯示：酒精組leptinmRNA表達(dá)增強(qiáng)，且1eptin/B-actin比值也高于對(duì)照組和正常