小麥光腥黑粉菌(Tilletia foetida)AFLP分析及其種的特異性SCAR標(biāo)記的發(fā)掘.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、小麥?zhǔn)鞘澜绺鲊饕Z食作物之一,是我國第二大糧食作物。小麥光腥黑穗病(commonbuntofwheat)是小麥生產(chǎn)上的一種毀滅性病害。該病發(fā)生歷史久遠(yuǎn),分布廣泛,流行性強(qiáng),危害嚴(yán)重。傳統(tǒng)的病害診斷、檢測方法主要是依據(jù)病原形態(tài)學(xué)、生理學(xué)和病害癥狀特性,不但過程繁瑣、時(shí)間周期長,而且準(zhǔn)確性差、精度不高。因此,研究開發(fā)快速、準(zhǔn)確的病害分子診斷、檢測技術(shù),對于防止該病害的傳播和蔓延,確保我國小麥安全生產(chǎn)具有重要的理論意義和應(yīng)用價(jià)值?! ”卷?xiàng)

2、研究從美國及國內(nèi)收集了小麥光腥黑粉菌5個(gè)菌株、小麥網(wǎng)腥黑粉菌3個(gè)菌株和小麥矮腥黑粉菌、玉米絲黑穗菌、小麥散黑穗菌等小麥光腥黑粉菌部分近緣種的冬孢子標(biāo)樣,分析比較了改良CTAB法、氯化芐法和SDS法從病原物冬孢子中提取基因組DNA,通過比較,最終建立了黑粉菌冬孢子總DNA提取的SDS法,該方法可以從病原菌微量冬孢子中成功提取基因組DNA。  本試驗(yàn)采用AFLP分子標(biāo)記技術(shù),通過對各種供試黑粉菌菌株的基因組DNA進(jìn)行酶切、連接、預(yù)擴(kuò)增、選

3、擇性擴(kuò)增和銀染檢測,共篩選了132對AFLP引物組合,獲得了其中一對引物組合(M09/E04),可擴(kuò)增出小麥光腥黑粉病菌種的特異性條帶。經(jīng)多次重復(fù)驗(yàn)證表明:該引物組合對所有供試的小麥光腥黑粉病菌5個(gè)菌株均可擴(kuò)增出特異性DNA片段,而在小麥網(wǎng)腥黑粉病菌、小麥矮腥黑粉病菌、玉米絲黑穗病菌和小麥散黑穗病菌等近緣種中,則未擴(kuò)增出該DNA片段。通過對該目的片斷的回收、純化、克隆和序列測定,表明該特異性DNA片段大小為286bp。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為小麥光

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