種子老化對(duì)棉花種質(zhì)遺傳完整性的影響.pdf

1、保證基因庫中種質(zhì)資源的安全保存和科學(xué)更新，確保種質(zhì)在貯藏及更新過程中維持其遺傳完整性是種質(zhì)安全保存研究的最核心課題。因此開展基因庫異質(zhì)種質(zhì)材料遺傳完整性變化影響因素的研究具有非常重要的現(xiàn)實(shí)意義。本研究選用不同老化程度、不同更新發(fā)芽率水平和不同繁殖世代數(shù)的棉花種子為材料，應(yīng)用cDNA-AFLP技術(shù)來分析種子老化造成的棉花種質(zhì)基因差異表達(dá)，進(jìn)而分析種子老化的機(jī)理，以及利用SRAP分子標(biāo)記技術(shù)和SSR分子標(biāo)記技術(shù)研究常異花授粉作物種質(zhì)資源在更

2、新過程中，不同更新發(fā)芽率水平和不同繁殖世代數(shù)的老化棉花種質(zhì)遺傳完整性的變化情況，為制定棉花種質(zhì)更新時(shí)的發(fā)芽率標(biāo)準(zhǔn)和繁殖方法提供實(shí)踐依據(jù)，也為其它常異花授粉作物的更新提供參考，以確保常異花授粉作物種質(zhì)資源世代安全更新，為基因庫貯存種質(zhì)發(fā)芽率更新標(biāo)準(zhǔn)和最佳繁殖更新方法的制定提供科學(xué)的理論和實(shí)踐依據(jù)。主要結(jié)論如下： 1．利用cDNA-AFLP技術(shù)分析老化棉花種子的基因差異表達(dá)，根據(jù)帶型可將得到的差異片段分為5個(gè)類型，分別回收、克隆7個(gè)

3、差異片段并利用BLASTN和BLASTX程序與網(wǎng)上數(shù)據(jù)庫(NCBI，National Center for Biotechnology In：formation)進(jìn)行同源性分析。其中一條在對(duì)照、老化16周、28周種子共有的片段與歐洲板栗(Castaneasativa)核糖體蛋白L33和擬南芥(Arabidopsis thaliana)核糖體結(jié)構(gòu)組分蛋白具有同源性；對(duì)照種子特有的一條片段與擬南芥(Arabidopsis thaliana)

4、中氧化還原酶和水稻(Oryza sativa)2-硝基丙烷雙加氧酶相關(guān)蛋白具有同源性；在老化36周種子特有的4條片段中：1條與水稻中被公認(rèn)的三肽基酶II蛋白具有同源性，而其他3條的同源序列功能不詳；此外，老化16周種子特有的一條片段無明顯同源序列。 2．利用SRAP和SSR分子標(biāo)記檢測(cè)29份棉花種質(zhì)遺傳完整性。結(jié)果表明，無論每一份不同更新發(fā)芽率水平繁殖后代的種質(zhì)之間，還是每一份不同繁殖世代數(shù)種質(zhì)之間，其等位基因頻率差異不顯著，也