檢測(cè)陰道毛滴蟲(chóng)感染的聚合酶鏈反應(yīng)方法的優(yōu)化和初步評(píng)價(jià).pdf

1、該課題的研究目的是:(1)比較并且篩選PCR檢測(cè)陰道毛滴蟲(chóng)所用的引物;(2)用陰道拭子標(biāo)本評(píng)價(jià)PCR檢測(cè)陰道毛滴蟲(chóng)的臨床意義;(3)對(duì)用PCR方法調(diào)查女性陰道毛滴蟲(chóng)感染的流行情況進(jìn)行初步研究.在該課題中,從已發(fā)表的文獻(xiàn)中篩選了TVA5-TVA6、TV1-TV2、TVK3-TVK73對(duì)引物進(jìn)行比較,每種PCR選擇引物、Mg<'2+>、dNTPs、Taq酶4個(gè)因素,每個(gè)因素取3個(gè)濃度水平,使用Taguchi法優(yōu)化,以便得出每種PCR的最佳反

2、應(yīng)條件.在最佳反應(yīng)條件下,比較3種PCR的敏感性,選擇敏感性最高的引物.此外,用濕片法、培養(yǎng)法和PCR方法檢測(cè)了106例婦女的陰道毛滴蟲(chóng)感染情況,以培養(yǎng)法作為金標(biāo)準(zhǔn),對(duì)濕片法和PCR方法進(jìn)行評(píng)價(jià).該研究結(jié)果初步表明:PCR檢測(cè)陰道毛滴蟲(chóng)感染敏感而特異,為實(shí)驗(yàn)室診斷和流行病學(xué)調(diào)查提供了新的方法;Taguchi法為PCR反應(yīng)條件優(yōu)化提供了省時(shí)準(zhǔn)確的優(yōu)化策略,與傳統(tǒng)法比較使實(shí)驗(yàn)次數(shù)明顯降低.對(duì)陰道毛滴蟲(chóng)感染有必要進(jìn)行更深入的研究,可以包括:(