黃芪桂枝五物湯對紫杉醇致外周神經(jīng)毒性氧化應(yīng)激的影響.pdf

1、目的：通過建立紫杉醇致CIPN的大鼠模型，觀察疼痛行為學變化、背根神經(jīng)節(jié)細胞病理學改變、血清及脊髓組織SOD活性、MDA含量的變化;背根神經(jīng)節(jié)TRPs（TRPV1、TRPA1）通道變化及背根神經(jīng)節(jié)NF-κB、MAPKs信號通路蛋白變化探討黃芪桂枝五物湯對紫杉醇致CIPN的干預(yù)作用及機制。
　　方法：選用40只成年SD雄性大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)后隨機分為空白組、模型組、黃芪桂枝五物湯低、高劑量組。模型組、中藥高劑量組、中藥低劑量組在第0，2

2、，4，6天時腹腔注射2mg/kg紫杉醇溶液，空白組腹腔注射同體積聚氧乙烯蓖麻油溶劑。中藥高劑量組予黃芪桂枝五物湯2.48g/ml，10ml/kg灌胃，低劑量組0.62g/ml，10ml/kg灌胃，每日1次，空白組、模型組予0.9％NaCl溶液灌胃10ml/kg，每日1次。紫杉醇用藥當天，中藥于紫杉醇應(yīng)用前一小時給藥，持續(xù)給藥至21天。每日觀察大鼠給藥后反應(yīng)、每周進行von Frey檢測和丙酮實驗。第21天解剖每組大鼠，解剖每組大鼠，心臟

3、灌注，腹主動脈采血，取雙側(cè)L4-L5背根神經(jīng)節(jié)及脊髓。1、檢測血清及脊髓組織中SOD活性及MDA含量變化。2、通過尼氏染色光鏡下測量大鼠背根神經(jīng)節(jié)核仁變化。3、RT-PCR、qPCR檢測各組大鼠背根神經(jīng)結(jié)中TRPs（TRPV1、TRPA1）基因水平變化。4、Western-blot方法檢測各組大鼠背根神經(jīng)結(jié)中NF-κB、MAPKs信號通路蛋白的含量。
　　結(jié)果：通過痛覺行為學測定及組織病理學檢測證實CIPN的模型制備成功。機械疼痛

4、閾值及冷痛閾值與空白組相比，模型組機械疼痛閾值、冷痛閾值明顯下降(P＜0.01)。與模型組相比，中藥黃芪桂枝五物湯可以減輕紫杉醇的外周神經(jīng)毒性引起的痛覺過敏(P＜0.01)，其中黃芪桂枝五物湯以高劑量效果最好(P＜0.05)。Von Frey4g、8g、15g機械閾值百分比顯示:與空白組相比，模型組Von Frey4g、8g、15g機械閾值百分比明顯升高(P＜0.01)。與模型組相比，中藥黃芪桂枝五物湯可以降低紫杉醇引起的外周神經(jīng)毒性的

5、百分比，其中黃芪桂枝五物湯以高劑量效果最好(P＜0.05)。血清及脊髓SOD活性及MDA含量顯示:與空白組相比，模型組血清及脊髓組織SOD活性均下降(P＜0.01)，模型組血清及脊髓組織MDA含量升高(P＜0.01)，而中藥可以增加血清及脊髓組織SOD活性(P＜0.05)，降低血清及脊髓組織MDA含量(P＜0.05)。qPCR顯示:與空白組相比，模型組大鼠背根神經(jīng)節(jié)TRPV1、TRPA1、mRNA表達顯著增加(P＜0.01)，與模型組相

6、比，中藥組可以下調(diào)TRPV1、TRPA1mRNA的表達(P＜0.01)。Western-blot顯示:NF-κB、MAPKs信號通路蛋白的含量均無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論：黃芪桂枝五物湯在改善紫杉醇致CIPN模型大鼠痛覺過敏和DRG病理改變的同時，可以上調(diào)血清及脊髓中SOD活性，降低血清及脊髓中MDA含量發(fā)揮直接抗氧化作用保護神經(jīng)元細胞，并且下調(diào)TRPV1、TRPA1 mRNA的表達間接發(fā)揮抗氧化作用保護神經(jīng)元細胞。