膽紅素對(duì)新生兒臍血單核細(xì)胞凋亡、吞噬功能和表面分子CD14CD86 、HLA－DR的影響.pdf

1、瀘州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文膽紅素對(duì)新生兒臍血單核細(xì)胞凋亡、吞噬功能和表面分子CD14CD86、HLA－DR的影響姓名：牛會(huì)琴申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：兒科學(xué)指導(dǎo)教師：陳昌輝200704013膽紅素對(duì)新生兒臍血單核細(xì)胞凋亡、吞噬功能和表面分子CD14CD86、HLA－DR的影響摘要目的：分離新生兒臍血單核細(xì)胞，經(jīng)不同濃度膽紅素處理，再給予脂多糖刺激，探討膽紅素對(duì)細(xì)胞凋亡率、細(xì)胞表面分子表達(dá)率和細(xì)胞吞噬功能的影響以及三者之間的關(guān)系。方法：1單核細(xì)

2、胞的分離鑒定，以正常足月新生兒為研究對(duì)象，收集臍靜脈血，采用纖維連接蛋白結(jié)合法分離臍血單核細(xì)胞。流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞純度，臺(tái)盼蘭檢測(cè)其活力。2膽紅素孵育單核細(xì)胞，將上述分離的單核細(xì)胞分別置于含有不同濃度膽紅素（0mgdl、6mgdl、9mgdl、12.9mgdl、18mgdl）的牛血清白蛋白溶液中孵育1h，倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化。3脂多糖刺激培養(yǎng)細(xì)胞，經(jīng)膽紅素孵育后，給予脂多糖（LPS，1ugml）刺激48小時(shí)，收集細(xì)胞。采用TU

3、NEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡率，雙色免疫熒光抗體標(biāo)記流式細(xì)胞儀技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表面分子的表達(dá)和熒光標(biāo)記的葡聚糖吞噬試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的吞噬功能。結(jié)果：①分離細(xì)胞后，流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD14陽(yáng)性細(xì)胞率為（93.992.48）%，0.4%臺(tái)盼蘭檢測(cè)細(xì)胞活性為（92.612.39）%。②倒置顯微鏡下觀測(cè)細(xì)胞，對(duì)照組細(xì)胞形態(tài)正常，膽紅素組細(xì)胞發(fā)生鋸齒樣變，細(xì)胞被黃染易發(fā)生聚集，在膽紅素為6mgdl時(shí)已經(jīng)存在，且隨濃度的增加，越明顯。③膽紅素作用后檢測(cè)細(xì)胞凋亡率結(jié)果