羊躑躅根質(zhì)量評(píng)價(jià)與體外免疫活性研究.pdf

1、羊躑躅根是杜鵑花科(Ericaceae)植物羊躑躅(Rhododendron MolleG.Don)的干燥根及根莖,具有抗炎、退熱、免疫抑制、鎮(zhèn)痛等藥理作用,臨床曾用于治療慢性腎小球腎炎以及類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。羊躑躅的花和果實(shí)在治療關(guān)節(jié)炎時(shí)因毒性大,使用受限制,本品毒性較小,作用可靠,具有很好的研究開(kāi)發(fā)前景。本課題的主要內(nèi)容如下:
　　1.首次對(duì)羊躑躅根的化學(xué)成份進(jìn)行系統(tǒng)預(yù)試驗(yàn),結(jié)果表明,羊躑躅根中含有萜類(lèi)、甾體類(lèi)、酚類(lèi)、鞣質(zhì)類(lèi)、糖

2、類(lèi)以及黃酮類(lèi)成分,可能含有或者少量含有香豆素及內(nèi)酯類(lèi)、蒽醌類(lèi)和揮發(fā)油類(lèi)成分,為今后羊躑躅根中化學(xué)成分的分離鑒定提供依據(jù)。
　　2.本文首次嘗試用不同的方法測(cè)定羊躑躅根中總酚酸的含量,為今后羊躑躅根的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供依據(jù)。運(yùn)用紫外可見(jiàn)分光光度法測(cè)定羊躑躅根中總酚酸的含量?？疾炝巳然F-鐵氰化鉀顯色(PB法)和福林酚顯色(F-C法)兩種方法,同時(shí),利用福林酚顯色考察了原兒茶酸和沒(méi)食子酸兩種對(duì)照品,最后選擇用福林酚顯色,原兒茶酸為對(duì)照品測(cè)

3、定總酚酸的含量。運(yùn)用HPLC法同時(shí)測(cè)定羊躑躅根中原兒茶酸和原兒茶醛的含量。原兒茶酸與原兒茶醛分別在10.65~106.50μg/ml和5.28~52.80μg/ml濃度范圍內(nèi)與其峰面積成良好的線性關(guān)系,r分別為0.9992和0.9990;平均回收率分別為98.3％和102.1%,RSD分別為0.99%和1.01%。
　　3.運(yùn)用體外脾淋巴細(xì)胞實(shí)驗(yàn),對(duì)羊躑躅根中九個(gè)提取部位進(jìn)行免疫活性的初篩,分別為水提物,醇提物,醇浸膏大孔樹(shù)脂50

4、%乙醇洗脫部分(簡(jiǎn)稱(chēng)50%部分),醇浸膏大孔樹(shù)脂95%乙醇洗脫部分(簡(jiǎn)稱(chēng)95%部分),氯仿部分,乙酸乙酯A部分,乙酸乙酯B部分,水提醇沉的沉淀部分和醇部分。本文考察了其對(duì)正常小鼠脾淋巴細(xì)胞以及ConA/LPS誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)的作用。選擇了四個(gè)對(duì)三種細(xì)胞增殖反應(yīng)均有較明顯抑制作用的部分,分別是氯仿部分、乙酸乙酯A部分、乙酸乙酯B部分以及95%部分,進(jìn)行了急性毒性試驗(yàn),利用0.3%-0.5%的CMC-Na配成混懸液灌胃給藥。結(jié)果

5、顯示四個(gè)部分均具有一定的毒性,LD50的大小依次為:95%部分LD50=2981.457mg/kg,乙酸乙酯A部分LD50=1908.497mg/kg,氯仿部分LD50=1080.341mg/kg,乙酸乙酯B部分LD50=887.703mg/kg。利用紫外可見(jiàn)分光光度法測(cè)定其中總酚酸和萜類(lèi)的含量,試圖分析其毒性大小原因?？偡铀岷看笮№樞虼笾聻?雙乙A部分>雙乙B部分>95%部分>氯仿部分;萜類(lèi)相對(duì)含量的順序大致為:氯仿部分>95%部分