降鈣素對不育癥患者精子功能影響的體外實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討不同濃度的鮭魚降鈣素(salmon calcitonin,sCT)在體外對不育癥患者精子運(yùn)動(dòng)功能、精子膜功能完整性、獲能以及誘發(fā)性和自發(fā)性頂體反應(yīng)的影響，為男性不育的診斷、體外治療以及人工授精等輔助生殖技術(shù)提供幫助。 方法：本實(shí)驗(yàn)共分為四個(gè)部分，第一、二和四部分都分為一個(gè)空白對照組和三個(gè)sCT加藥組共四組進(jìn)行；第三部分則分為空白對照組、孕酮組和三個(gè)sCT加藥組共五組進(jìn)行。第一部分將終濃度為0.05rnmol/L、0.5

2、nmol/L和5nmol/L的sCT在體外與經(jīng)上游優(yōu)化處理的不育癥患者的精子分別共同孵育，同時(shí)設(shè)立空白對照組，在孵育0min、30min和60min時(shí)采用計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)(CASA)對它們分別進(jìn)行精液常規(guī)分析。第二部分對第一部分60mm時(shí)的各組精液分別進(jìn)行低滲腫脹(HOS)實(shí)驗(yàn)。第三部分首先將終濃度為0.05nmol/L、0.5nmol/L和5nmol/L的sCT在體外與經(jīng)上游優(yōu)化處理的不育癥患者未獲能的精子孵育60min促使精子

3、獲能，同時(shí)設(shè)立空白對照組，然后以孕酮誘發(fā)精子發(fā)生頂體反應(yīng)，用特異性熒光標(biāo)記物——絡(luò)合異硫氰酸熒光素的豌豆凝集素(FITC-PSA)標(biāo)記頂體，通過流式細(xì)胞儀檢測頂體完整性。第四部分先將不育癥患者未獲能的精子和巖藻糖一起孵育4小時(shí)促使精子獲能和發(fā)生自發(fā)性頂體反應(yīng)，然后再在試管中分別加入終濃度為0.05nmol/L、0.5nmol/L和5nmol/L的sCT孵育2個(gè)小時(shí)，同時(shí)設(shè)立空白對照組，不加孕酮，用特異性熒光標(biāo)記物——絡(luò)合異硫氰酸熒光素的

4、豌豆凝集素(FITC-PSA)標(biāo)記項(xiàng)體，通過流式細(xì)胞儀檢測頂體完整性。 結(jié)論：在體外實(shí)驗(yàn)中sCT可以明顯改善男性不育癥患者精子的運(yùn)動(dòng)功能，對精子膜功能的完整性是不具有影響；對于未獲能的男性不育癥患者精子，sCT在體外可以明顯促進(jìn)精子獲能和增強(qiáng)孕酮所誘發(fā)的頂體反應(yīng)，而當(dāng)精子獲能以后，sCT又可以抑制精子自發(fā)性頂體反應(yīng)的發(fā)生，從而提高了精子潛在的受精能力；sCT對人精子可能的作用原理：通過人精子膜上mAC/cAMP信號傳導(dǎo)通道起作用