東方蜜蜂和西方蜜蜂的毒理學(xué)特性比較研究.pdf

1、本論文從羧酸酯酶(CarE)測(cè)定方法、靶標(biāo)酶和解毒酶體軀和亞細(xì)胞分布、發(fā)育期變化規(guī)律、化學(xué)農(nóng)藥毒力測(cè)定以及亞致死劑量化學(xué)農(nóng)藥對(duì)東方蜜蜂Apis cerana和西方蜜蜂Apismellifera解毒酶影響等方面進(jìn)行了系統(tǒng)的比較研究，以期為蜜蜂保護(hù)，尤其是我國(guó)東方蜜蜂保護(hù)提供依據(jù)。同時(shí)，研究了氟胺氰菊酯對(duì)西方蜜蜂和大蜂螨選擇毒性，明確了大蜂螨抗性水平，確定了抗性機(jī)制，為中國(guó)大蜂螨防治提供理論和應(yīng)用依據(jù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： 1．以α-乙酸

2、萘酯(α-NA)為底物，采用正交方法確定了西方蜜蜂CarE活力測(cè)定最佳條件為酶終濃度0.3個(gè)腹部/mL、底物終濃度4×10<'-4>mol/L、pH值7.0、溫度35℃、時(shí)間10 min。 2．比較研究了兩種蜜蜂成年工蜂靶標(biāo)酶和解毒酶體軀和亞細(xì)胞分布。頭部是蜜蜂乙酰膽堿酯酶(AChE)活性最高部位，在細(xì)胞內(nèi)活性主要集中在線粒體層。CarE主要集中在腹部，在細(xì)胞內(nèi)主要存在于細(xì)胞液中。谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶(GST)活性主要集中于中腸，在

3、細(xì)胞中主要位于細(xì)胞液中。但不同蜂種不同組織的不同亞細(xì)胞層比例不同。東、西方蜜蜂各軀段CarE與底物親和力不同。 3．從幼蟲(chóng)到成蟲(chóng)，GSTs和CarE活性存在顯著變化，AChE活性變化不顯著。東方蜜蜂AChE和GSTs活性隨著發(fā)育進(jìn)程呈增加趨勢(shì)，西方蜜蜂工蜂體內(nèi)AChE活性呈減少趨勢(shì)。 東方蜜蜂除蛹期AChE活性顯著高于西方蜜蜂外，其它發(fā)育期AChE和GSTs活性低于西方蜜蜂，CarE活性則高于西方蜜蜂(α-NA為底物)。

4、不同發(fā)育階段東、西方蜜蜂CarE底物特異性不同。西方蜜蜂雄蜂幼蟲(chóng)和蛹三種酶活性高于工蜂。 4．西方蜜蜂成年工蜂三種酶活性隨日齡變化。21日齡時(shí)GST活性顯著升高。 5．AchE、CarE和GST活性在蜂種間存在顯著差異。意大利蜂AChE活性最高。高加索蜂GST活性活性最高。以僅α-NA為底物時(shí)，蜂種間CarE差異不顯著。以β-NA為底物時(shí)，卡尼鄂拉蜂CarE活性最高。不同蜂種以β-NA為底物時(shí)CarE活性均高于以α-NA

5、為底物活性。 6．對(duì)甲氰菊酯等5種化學(xué)藥劑，東方蜜蜂比西方蜜蜂更敏感。LC<,5>五種化學(xué)藥劑在24h內(nèi)對(duì)東、西方蜜蜂解毒酶作用不同。農(nóng)藥對(duì)東方蜜蜂CarE、AChE(馬拉硫磷除外)影響大于西方蜜蜂，而對(duì)GST影響則是西方蜜蜂大于東方蜜蜂(雙甲脒除外)。 7．LC5甲氰菊酯、滅多威和馬拉硫磷能誘導(dǎo)東方蜜蜂AChE活性增加，降低西方蜜蜂AChE活性。LC<,5>氟胺氰菊酯誘導(dǎo)西方蜜蜂AChE活性增加，抑制東方蜜蜂AChE活

6、性增加。LC<,5>雙甲脒能誘導(dǎo)東方蜜蜂AChE，對(duì)西方蜜蜂影響不大。五種農(nóng)藥均可以誘導(dǎo)東方蜜蜂腹部CarE增加，其中氟胺氰菊酯是先誘導(dǎo)再抑制。五種化學(xué)農(nóng)藥均抑制西方蜜蜂體內(nèi)CarE活性。除滅多威外的四種化學(xué)藥劑均抑制西方蜜蜂GST活性，滅多威在2-16h誘導(dǎo)，20-24h抑制。對(duì)東方蜜蜂而言，甲氰菊酯、滅多威能抑制GST酶活性：雙甲脒誘導(dǎo)GST；馬拉硫磷和氟胺氰菊酯先抑制再誘導(dǎo)。 8．生物測(cè)定結(jié)果表明，西方蜜蜂對(duì)氟胺氰菊酯的耐