納米CD133Ab(anti-body)-SPIO對(duì)膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞放療增敏及MRI顯像初步研究.pdf

1、目的:1.觀察納米CD133Ab(anti-body)-SPIO復(fù)合物聯(lián)合放療對(duì)人腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞株生長(zhǎng)的影響，并評(píng)價(jià)兩者的聯(lián)合效應(yīng);2.觀察納米CD133Ab(anti-body)-SPIO復(fù)合物對(duì)人腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞體外磁共振成像的影響。
　　 方法:1.制備納米CD133Ab(anti-body)-SPIO復(fù)合物并使用H-600型TEM對(duì)其進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察;2.細(xì)胞免疫組化方法檢測(cè)腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞中CD133分子的

2、表達(dá)情況;3.流式細(xì)胞分選出人腦膠質(zhì)瘤U251-CD133+細(xì)胞;4.WesternBlotting法檢測(cè)U251細(xì)胞分選前后CD133的表達(dá)水平;5.將納米CD133Ab(anti-body)-SPIO復(fù)合物、SPIO、CD133Ab(anti-body)分別與腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞及篩分后U251-CD133+細(xì)胞孵育，體外磁共振成像(MRI)觀察各組T2弛豫時(shí)間;6.MTT法觀察納米CD133Ab(anti-body)-SPIO復(fù)合

3、物和CD133Ab(anti-body)對(duì)人腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞及分選后U251-CD133+細(xì)胞毒作用;7.克隆形成抑制實(shí)驗(yàn)檢測(cè)納米CD133Ab(anti-body)-SPIO復(fù)合物和CD133Ab(anti-body)對(duì)腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞放射增敏的影響。
　　 結(jié)果:1.透射電鏡觀察納米CD133Ab(anti-body)-SPIO復(fù)合物近似圓形，電子密度高，呈散在分布或聚集成片;2.腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞中有CD133分

4、子陽性表達(dá);3.分選出CD133表達(dá)陽性的細(xì)胞;4.分選后細(xì)胞CD133分子表達(dá)水平比分選前的明顯升高;5.體外磁共振成像(MRI)顯示腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞及篩分后U251-CD133+細(xì)胞的復(fù)合物組T2弛豫時(shí)間低于其它三組(p＜0.05);6.在0.0488μg/ml～25μg/ml范圍內(nèi)，復(fù)合物作用于腦膠質(zhì)瘤U251及U251-CD133+細(xì)胞24h，細(xì)胞毒性呈明顯劑量依賴性，與陰性對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，50％細(xì)胞抑制率(I

5、C50)為分別為11.84μg/mL和12.06μg/mL，在25μg/mL時(shí)腫瘤細(xì)胞增殖抑制率最高值分別為59.46％和56.66％;7.CD133Ab+照射組與單純照射組（陰性對(duì)照組）比較，細(xì)胞存活分?jǐn)?shù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，CD133Ab(anti-body)-SPIO復(fù)合物+照射組與CD133Ab+照射組比較，細(xì)胞存活分?jǐn)?shù)差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，在照射4Gy以上隨X射線劑量增加而增強(qiáng)。
　　 結(jié)論: