DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3a和羥脯氨酸在鹽酸異丙腎上腺素致大鼠心肌纖維化中的作用機(jī)制研究.pdf

1、目的：心房顫動(dòng)(atrial fibrillation,AF)是臨床上最常見的快速型室上性心律失常之一,對(duì)于心房顫動(dòng)的發(fā)生機(jī)制一直是國內(nèi)外心血管領(lǐng)域內(nèi)的研究熱點(diǎn)之一,心房顫動(dòng)與心肌纖維化之間存在相關(guān)性已經(jīng)被證明。本實(shí)驗(yàn)旨在研究維持心房顫動(dòng)發(fā)生和發(fā)展的重要機(jī)制-心肌纖維化的發(fā)生發(fā)展過程,探討 DNMT3a和Hyp在異丙腎上腺素(Isoprenaline,ISO)誘導(dǎo)的大鼠心肌纖維化中的表達(dá)的變化以及相關(guān)性研究。
　　方法：利用皮下注

2、射ISO制備大鼠心肌纖維化模型,隨機(jī)將40只雄性SD大鼠等分為空白對(duì)照組和模型組,每組20只。其中模型組給予皮下注射ISO5mg/kg·d、空白對(duì)照組給予等劑量生理鹽水皮下注射,連續(xù)注射7天后,進(jìn)食不禁水12小時(shí),稱體重后處死大鼠獲取抗凝血液標(biāo)本,離心,獲取上清,取下心臟,稱重記錄,分別獲取心肌組織標(biāo)本。計(jì)算心重指數(shù)(HW/BW)和左心室重指數(shù)(LVW/BW);HE染色和Masson染色法觀察心肌組織的纖維化程度并計(jì)算膠原容積分?jǐn)?shù)(CV

3、F);應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試劑盒測(cè)定模型組和空白對(duì)照組血清中I型膠原和III型膠原的含量;Western blot法測(cè)定模型組和空白對(duì)照組大鼠心肌組織中DNMT3a和α-SMA的蛋白表達(dá);利用羥脯氨酸試劑盒測(cè)定模型組和空白對(duì)照組大鼠心肌組織中羥脯氨酸(Hydroxproline,Hyp)的含量,并分析DNMT3a和Hyp之間的相關(guān)性。
　　結(jié)果：皮下注射ISO7天后,稱重并計(jì)算后發(fā)現(xiàn)模型組大鼠心重指數(shù)(HW/BW)和左心室重指數(shù)(LV

4、W/BW)與空白對(duì)照組相比較明顯增加(P<0.05),說明心臟出現(xiàn)了明顯的纖維化,并以左室為主;模型組大鼠血清標(biāo)本中I型膠原和III型膠原的含量較空白對(duì)照組明顯增加(P<0.05);HE染色和Masson染色顯示模型組大鼠心肌組織間質(zhì)中出現(xiàn)了明顯的膠原纖維增生;計(jì)算心肌間質(zhì)膠原容積分?jǐn)?shù)(CVF)較對(duì)照組增加;Western blot法檢測(cè)結(jié)果顯示模型組大鼠心肌組織中 DNMT3a和α-SMA的表達(dá)明顯高于空白對(duì)照組(P<0.05);同時(shí)