苦參堿對(duì)慢性心力衰竭大鼠心室重構(gòu)的干預(yù)作用及其分子機(jī)制研究.pdf

1、第一部分:苦參堿對(duì)慢性心力衰竭大鼠心室重構(gòu)的干預(yù)作用
　　目的:研究苦參堿對(duì)異丙腎上腺素(isoproterenol，ISO)致慢性心力衰竭模型大鼠心室重構(gòu)及心功能衰竭的干預(yù)作用。
　　方法:Sprague-Dawley大鼠皮下注射異丙腎上腺素（ISO，5mg/kg/d，連續(xù)7天）建立大鼠慢性心衰模型，同時(shí)觀察苦參堿（25、50和100mg/kg，每天1次，連續(xù)7天）給藥對(duì)模型大鼠體重、心肌肥厚指數(shù)、心肌損傷標(biāo)志酶、心肌組織

2、形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)、心率、血壓、左心室收縮壓（LVSP）、左心室終末舒張壓（LVEDP）、左心室內(nèi)壓最大上升速率（LVdP/dtmax）以及左心室內(nèi)壓最大下降速率（LVdP/dtmin）的影響。
　　結(jié)果:大鼠體重在各實(shí)驗(yàn)組之間無顯著性變化（allP＞0.05）。與正常對(duì)照組相比，模型組大鼠心肌肥厚指數(shù)和血清心肌損傷標(biāo)志酶顯著性增加，提示模型組大鼠具有顯著性心肌肥厚并伴隨心肌細(xì)胞壞死或凋亡；組織病理學(xué)顯示模型組大鼠心肌細(xì)胞直徑（CD）和橫

3、截面積（CSA）以及間質(zhì)膠原纖維含量顯著增加，表明大鼠心肌細(xì)胞和心肌成纖維細(xì)胞顯著性肥大或增殖，心室發(fā)生重構(gòu)。另外可見模型組大鼠可見心功能顯著低下，表現(xiàn)為L(zhǎng)VSP和LVdP/dtmax顯著降低和LVEDP和LVdP/dtmin顯著升高（P＜0.01），表明模型組大鼠發(fā)生心力衰竭；同時(shí)收縮壓和心率顯著降低（P＜0.05），但是舒張壓組間無差別?？鄥A(25、50和100mg/kg/d，7天)給藥后顯著降低了心肌肥厚指數(shù)（全心濕質(zhì)量/體質(zhì)量

4、比、左心室濕質(zhì)量/體質(zhì)量比）和血清心肌損傷標(biāo)志酶：乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)的含量和心肌肌鈣蛋白（cTn-I）的含量；組織病理學(xué)結(jié)果顯示，苦參堿可顯著減輕大鼠肥厚性心肌組織病理結(jié)構(gòu)的異常改變即抑制心肌細(xì)胞肥大和間質(zhì)心肌纖維化；另外同時(shí)顯著改善了大鼠左心室收縮功能（升高LVSP和LVdP/dtmax）、舒張功能（降低LVEDP和LVdP/dtmin）以及收縮壓和心率。
　　結(jié)論:苦參堿對(duì)ISO致大鼠心力衰竭模型心室重構(gòu)及

5、心功能衰竭具有保護(hù)作用。
　　第二部分:苦參堿關(guān)于預(yù)防慢性心衰大鼠心室重構(gòu)的分子機(jī)制研究
　　目的:研究ISO致SD大鼠慢性心力衰竭模型心室重構(gòu)組織中PI3Kγ/Akt/GSK-3β信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、PRMT1/ADMA/DDAH2系統(tǒng)、ODC/SSAT系統(tǒng)的蛋白表達(dá)，以期在眾多信號(hào)通路中為苦參堿抗大鼠心室重構(gòu)篩選出其可能作用的藥物靶點(diǎn)。
　　方法:分別用ELISA方法和生物化學(xué)法檢測(cè)血清ADMA和NO的含量，并用West

6、ernblot方法測(cè)定大鼠心室PI3Kγ、Akt、p-Akt(Ser473)、p-Akt(Thr308)、GSK-3β、p-GSK-3β(Ser9)、iNOS、eNOS、p-eNOS(Ser1177)、PRMT1、DDAH2、ODC、SSAT等蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果:與正常對(duì)照組相比，ISO組大鼠血清NO水平顯著性降低，而ADMA血清水平顯著性升高；心肌組織內(nèi)PI3Kγ、Akt、p-Akt(Ser473)、p-Akt(Thr308

7、)、p-GSK-3β(Ser9)、iNOS、PRMT1、ODC、SSAT蛋白含量顯著性提高，而GSK-3β、eNOS、p-eNOS(Ser1177)、DDAH2含量顯著性降低?？鄥A（25、50和100mg/kg）給藥后可下調(diào)模型大鼠心肌組織PI3Kγ、Akt、p-Akt(Ser473)、p-Akt(Thr308)、p-GSK-3β(Ser9)、iNOS、ODC蛋白的表達(dá)，同時(shí)可上調(diào)GSK-3β、eNOS、p-eNOS(Ser1177)