蟛蜞菊內(nèi)酯降血脂、肝保護(hù)及相關(guān)作用機(jī)制研究.pdf

1、目的:蟛蜞菊內(nèi)酯屬于呋喃香豆素類，據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道其具有抑制肝細(xì)胞纖維化、抗炎、免疫調(diào)節(jié)、抗絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松等作用，本文首次探討蟛蜞菊內(nèi)酯的降血脂作用及相關(guān)機(jī)制。
　　方法:首先通過體外實(shí)驗(yàn)觀察蟛蜞菊內(nèi)酯對脂質(zhì)代謝相關(guān)基因和蛋白表達(dá)的影響。HepG2細(xì)胞給藥24h，提取蛋白及RNA，采用蛋白印跡法測定腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)和過氧化物酶體增殖物活化受體α(PPARα)的蛋白表達(dá)水平，用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測AMPK、PPARα、

2、低密度脂蛋白受體(LDLR)以及脂蛋白脂酶(LPL)基因表達(dá)水平。采用DPPH法測定蟛蜞菊內(nèi)酯體外直接清除自由基的能力。用油酸(OA)誘導(dǎo)HepG2細(xì)建立胞脂質(zhì)過氧化模型，給藥孵育12h后裂解細(xì)胞并檢測裂解液中SOD水平以檢測蟛蜞菊內(nèi)酯體外抗氧化活性。然后采用腹腔注射Triton WR-1339建立小鼠急性高脂血癥模型對蟛蜞菊內(nèi)酯的降脂活性進(jìn)行初步篩查，再通過高脂飲食喂養(yǎng)建立高脂動物模型，灌胃給藥四周后，處死取血及肝臟，檢測高臘金黃地鼠

3、血清及肝臟脂質(zhì)水平，肝臟冰凍切片進(jìn)行HE及油紅O染色，觀察肝臟病理形態(tài)及脂滴蓄積情況。
　　結(jié)果:經(jīng)HepG2細(xì)胞給藥24h后，LPL、LDLR以及AMPK的mRNA表達(dá)均被上調(diào)，磷酸化AMPK(p-AMPK)以及PPARα的蛋白表達(dá)也明顯升高。而體外抗氧化活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示蟛蜞菊內(nèi)酯有較好的氧自由基清除能力(IC50=46μg/ml)，并且蟛蜞菊內(nèi)酯能有效升高OA誘導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化細(xì)胞模型中的SOD水平。動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，蟛蜞菊內(nèi)酯

4、能降低血漿中總膽固醇(TC)，甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)和肝臟TC、TG水平，同時(shí)血漿中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和肝臟丙二醛(MDA)含量明顯降低，并顯著增強(qiáng)肝臟超氧化物歧化酶(SOD)，谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活力，從而提高肝臟抗氧化水平緩解肝損傷。
　　結(jié)論:蟛蜞菊內(nèi)酯能有效降低高脂飲食誘導(dǎo)的高脂金黃地鼠的血脂及肝臟脂質(zhì)水平，并且可以通過直接清除ROS和升高抗氧化物酶的水平有效減輕ROS造成的肝臟