IL-28B基因多態(tài)性與中國(guó)HIV-HCV合并感染者普通干擾素療效的關(guān)系.pdf

1、人類免疫缺陷病毒（Human immunodeficiency virus，HIV）是引起艾滋?。ˋcquired immunodeficiency syndrome，AIDS）的病原體，HIV感染人體后，進(jìn)行性破壞機(jī)體免疫功能，導(dǎo)致機(jī)體細(xì)胞免疫功能受損乃至缺陷，最終導(dǎo)致以機(jī)會(huì)性感染和惡性腫瘤發(fā)生為特征的綜合癥。丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）是引起丙型肝炎的病原體，HCV感染人體后，直接殺傷并破壞肝臟細(xì)胞，聯(lián)

2、合宿主免疫因素、自身免疫及細(xì)胞凋亡等因素而引起肝細(xì)胞的水腫、變性、壞死，導(dǎo)致肝炎的發(fā)生。隨著肝細(xì)胞壞死后不規(guī)則再生，導(dǎo)致肝硬化的產(chǎn)生，肝細(xì)胞的正常功能受損，并大大增加了肝衰竭及肝癌的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。因?yàn)镠IV及HCV擁有血液傳播、性傳播、母嬰垂直傳播等共同的傳播途徑，二者引起的慢性感染常相互伴隨存在。由于HIV/HCV合并感染者免疫抑制的進(jìn)展，明顯加快了丙肝的病程進(jìn)展。單純HCV感染者進(jìn)展為肝衰竭或肝癌約需30-40年，而HIV/HCV合并感

3、染者則縮短到10-20年。隨著高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療（Highly active antiretroviral therapy，HAART）的開展，HIV感染者的生存期得到明顯延長(zhǎng)，使得HIV/HCV合并感染者有機(jī)會(huì)進(jìn)展為肝衰竭或肝癌，加上HAART藥物的肝毒性，終末期肝病成為了HIV/HCV合并感染者生命的最大威脅，故控制HCV感染或清除HCV是保證HIV/HCV合并感染者延長(zhǎng)生命的關(guān)鍵因素。而為達(dá)到這一目的，針對(duì)HIV/HCV合并感染

4、者如何提高抗HCV治療效果的研究是非常必要的。近年來，國(guó)外的多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)宿主白細(xì)胞介素-28B（interleukin-28B，IL-28B）基因的單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphisms，SNP）與干擾素的療效關(guān)系非常密切，但國(guó)內(nèi)的此類研究尚不足，特別是針對(duì)HIV/HCV合并感染人群的研究尚未見報(bào)道。
　　研究目的：
　　研究中國(guó)HIV/HCV合并感染者IL-28B基因多態(tài)性分布，IL

5、-28B基因型與普通干擾素抗HCV應(yīng)答的關(guān)系。
　　研究對(duì)象及研究方法：
　　1.納入140名CD4+T細(xì)胞計(jì)數(shù)＞200/ul的HIV/HCV合并感染者，給予抗HCV治療（IFN-α-2b聯(lián)合利巴韋林治療48周），收集患者抗HCV治療前，治療4周、12周、24周、48周和停藥后24周的外周靜脈抗凝血，分離血漿和外周血單個(gè)核細(xì)胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMC）。
　　2.

6、提取患者PBMC中基因組DNA，設(shè)計(jì)特異性引物分別擴(kuò)增包含IL-28B基因rs8099917、rs12979860及rs12980275的區(qū)域，測(cè)序分析各SNP位點(diǎn)基因型。
　　3.采用COBASTM全自動(dòng)病毒載量分析系統(tǒng)檢測(cè)血漿HCV載量。
　　4.提取患者血漿中HCV-RNA，設(shè)計(jì)特異性引物，采用巢氏PCR擴(kuò)增治療前血漿中HCV的NS5B基因區(qū)域，PCR產(chǎn)物經(jīng)測(cè)序分析獲得堿基序列，與美國(guó)Los Alamos國(guó)家實(shí)驗(yàn)室HC

7、V數(shù)據(jù)庫(kù)的Blast程序進(jìn)行比對(duì)后獲得HCV基因型。
　　5.選用快速病毒學(xué)應(yīng)答（rapid virological response,RVR）、完全早期病毒學(xué)應(yīng)答（complete early virological response,cEVR）、早期病毒學(xué)應(yīng)答（early virological response,EVR）、治療末病毒學(xué)應(yīng)答（end of treatment virological response,ETVR）

8、及持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答（sustained virological response,SVR）作為臨床療效判斷標(biāo)準(zhǔn)。
　　6.采用SPSS16.0軟件，運(yùn)用χ2檢驗(yàn)及方差分析等統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。
　　研究?jī)?nèi)容及研究結(jié)果：
　　1.140名HIV/HCV合并感染者IL-28B基因分型均成功，rs8099917基因型：TT87.1％、TG12.9%；rs12979860基因型：CC85.7%，CT14.3%；rs12

9、980275基因型：AA85.0%，AG15.0%。
　　2.140名HIV/HCV合并感染者中有126例HCV基因分型成功，其中HCV-1型占30.2%，HCV-非1型占69.8%（HCV-2為2.4%，HCV-3為36.5%，HCV-6為31.0%）。
　　3.我國(guó)HIV/HCV合并感染者普通干擾素聯(lián)合利巴韋林治療后RVR率為20.7%，cEVR率為55.0%，EVR率為80.0%，ETVR率為47.1%，SVR率為35

10、.7%。HIV/HCV-1型合并感染者與HIV/HCV-非1型感染者之間普通干擾素療效無顯著差異（P>0.05）。獲得RVR的患者最終獲得SVR率為65.5%，而未獲得RVR的患者最終獲得SVR率為27.9%，兩者之間有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.001）；獲得cEVR的患者最終獲得SVR率為57.1%，而未獲得cEVR的患者最終獲得SVR率為9.5%，兩者之間有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.001）；獲得EVR的患者最終獲得SVR率為42.9%

11、，而未獲得EVR的患者最終獲得SVR率7.1%，兩者之間有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.001）。
　　4. IL-28B基因rs12879860位點(diǎn)SNP與HIV/HCV-1合并感染者普通干擾素能否獲得cEVR、EVR、ETVR及SVR顯著相關(guān)（P=0.005；P=0.005；P=0.014；P=0.038），其中CC型較C/T型有更高的SVR率（35.5%比0%）。rs12980275位點(diǎn)SNP與HIV/HCV-1合并感染者普通干擾

12、素治療能否獲得cEVR、EVR、ETVR及SVR顯著有關(guān)（P=0.002；P=0.001；P=0.006；P=0.037），其中AA型較A/G型有更高的SVR率（39.3%比0%）。rs8099917位點(diǎn)SNP與HIV/HCV-1合并感染者普通干擾素治療能否獲得cEVR及ETVR顯著有關(guān)（P=0.014；P=0.033）。而HIV/HCV-非1型患者IL-28B基因型與普通干擾素療效的關(guān)系無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　研究結(jié)論：